三氧化二砷对急性早幼粒细胞白血病细胞凋亡相关基因表达的影响

摘要

本研究采用微矩阵基因芯片技术探讨三氧化二砷(As2O3)对NB4细胞凋亡的相关基因表达谱的影响。As2O3作用NB4细胞48小时,用改进的TRIZOL试剂一步法抽提As2O3作用前后的NB4细胞总RNA;经逆转录-聚合酶链反应后用Cy3标记的脱氧三磷酸尿苷(Cy32dUTP)和Cy52dUTP两种不同的荧光染料,将As2O3作用前后的NB4细胞mRNA分别标记成两种DNA探针,并与载有一组凋亡相关基因的表达谱芯片进行杂交,扫描分析筛选As2O3作用前后NB4细胞表达差异的凋亡基因;采用逆转录实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)检测p21,survivin,cdc2及Wee1 Hu等方法检测细胞凋亡。结果表明:从As2O3作用后NB4细胞中筛选出表达差异的凋亡相关基因共18条,包括p21,survivin,cdc2及Wee1 Hu等,表达上调的有6条,表达下调有12条;p21、survivin、cdc2及Wee1 Hu可能与As2O3诱导NB-4细胞的分化和(或)凋亡有关。结论:As2O3介导的NB4细胞凋亡的发生机制中、p21、sur-vivin、cdc2及Wee1可能发挥着重要作用。