转人Cu,Zn-SOD基因马铃薯的研究

摘要

采用 RT-PCR技术从人肝总 RNA中分离扩增了 490 bp的人铜锌超氧化物歧化酶(h Cu,Zn-SOD)基因的 c DNA序列 ,进行了序列测定 ,结果和文献报道的一致 ;构建了 Ca Mv3 5 S启动子驱动 h Cu,Zn-SOD基因的植物表达载体 PBICu SOD;用三亲交配法将重组质粒 PBICu SOD转化到农杆菌 LBA440 4,转化马铃薯得到转基因植株。PCR和 Southern-blot分析证明 ,h Cu,Zn-SOD基因已整合到马铃薯基因组中。Western blot分析表明 ,h Cu,Zn-SOD基因在转基因马铃薯植株中得到表达。用 NBT光还原法测定转基因马铃薯植株中的 SOD酶活力 ,叶的总酶活为1 0 66.6U/ g(湿重 ,下同 ) ,块茎的总酶活为 1 0 1 1 U/ g。