东方弧菌SOD的分离纯化和特性研究

摘要

从东方弧菌５１８菌株的细胞中提取超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）。先以硫酸铵分级沉淀取得粗酶，再经ＤＥ－５２ＤＥＡＥ－纤维素柱层析，并以５－５００ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸钾缓冲液作线性梯度洗脱，再次分级沉淀而获得纯化的ＳＯＤ，呈棕黄色。其分子量为３８０００道尔顿，为二聚体，亚基分子量为１８５００道尔顿。原子吸收光谱测定其金属辅基为Ｆｅ＋＋＋。该酶反应最适温度为２５℃，室温下水溶液中很易失活。紫外及可见光吸收光谱测定结果表明在２５７ｎｍ处有最大吸收峰，荧光发射光谱在３３９ｎｍ处有最大发射峰。