PCV2 Rep蛋白N-糖基化位点突变对病毒复制的影响

摘要

N-糖基化对病毒的感染与增殖均具有重要作用,与PCV2复制相关的Rep蛋白含有三个N-糖基化位点.为了分析PCV2 Rep蛋白N-糖基化位点突变对病毒复制的影响,本试验构建了三个双拷贝突变体感染性克隆2M 23、2M256、2M286,并成功拯救病毒.通过间接免疫荧光检测病毒的拯救效果,TCID50测定病毒的感染力,荧光定量PCR检测细胞病毒的载量.结果显示,PCV2 Rep蛋白的23～25 aa、256～258 aa N-糖基化位点突变后降低病毒的复制能力,而286～288 aa突变后增强病毒的复制能力,为进一步阐明PCV2的复制及致病机制提供参考.