INHA基因干扰对马关无角山羊卵巢颗粒细胞的影响

摘要

为了揭示INHA基因在马关无角山羊卵泡发育过程中的作用,为山羊多胎性状的研究提供理论依据,以高繁殖力地方品种-马关无角山羊的卵巢颗粒细胞为研究对象,采用siRNA技术,对卵巢颗粒细胞所分泌的糖蛋白激素基因INHA进行了干扰,Western blot法检验了干扰后INHA蛋白的表达量,Real-time PCR法检测了干扰后凋亡家族主要基因、主要生长因子及激素受体的mRNA表达量变化.Western blot结果显示,干扰48 h后的INHA蛋白的表达量极显著低于正常组和阴性对照组(negative control,NC)(P＜0.01);Real-timePCR结果显示,凋亡促进基因Bax在转染后,表达量极显著低于正常组和NC组(P＜0.01),凋亡抑制基因bcl-2和bcl-xl基因在转染后,表达量极显著高于正常组和NC组(P＜0.01);主要生长因子IGF-1和IGF-2基因在转染后,mRNA的表达量明显减少(P＜0.01),其中IGF-1的表达量降低最为明显;激素受体FSHR和LHR基因mRNA的表达量极显著低于正常组和NC组(P＜0.01).由此推测,INHA基因可能是通过影响卵巢颗粒细胞凋亡/增殖,进而影响了卵泡的发育.