组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA抑制结肠癌HT29细胞增殖作用的机制研究

摘要

目的 探讨组蛋白去乙酰化酶抑制TSA对结肠癌HT29细胞增殖能力的影响及其作用机制.方法 以结肠癌HT29细胞为研究对象,采用浓度梯度TSA处理并计算其对上述细胞的IC50值,并采用MTT法观察不同浓度TSA对结肠癌HT29细胞增殖能力的影响;采用流式细胞术观察不同浓度TSA对结肠癌HT29细胞周期的影响;Western blot法观察不同浓度TSA对结肠癌HT29细胞中Ku70蛋白乙酰化水平以及对细胞周期蛋白CyclinB1、CDC25C和周期抑制蛋白P21及其上游调控蛋白P53表达的影响.结果 MTT法和流式细胞术检测结果表明,TSA可浓度依赖性抑制结肠癌HT29细胞的增殖并促进细胞发生G2/M期阻滞;此外,Western blot检测结果表明TSA可明显上调结肠癌HT29细胞中Ku70蛋白的乙酰化水平,同时上调周期抑制蛋白P21和P53的表达,并抑制细胞周期相关蛋白CyclinB1和CDC25C的表达,差异有统计学意义(P<0.05).结论 组蛋白去乙酰化酶抑制剂(TSA)可能通过促进结肠癌HT29细胞中Ku70蛋白乙酰化,抑制其与DNA结合的亲和力而抑制DNA损伤修复,进而促进结肠癌HT29细胞发生周期阻滞而发挥抗结肠癌细胞增殖并促进其周期阻止的作用,为以细胞周期调控为靶点的肿瘤治疗策略提供理论依据和实验基础.