龟源弗氏柠檬酸杆菌的分离鉴定及药敏特性研究

摘要

为探明患病巴西龟Trachemys scripta elegans的病原及其生物学特征,从病龟体内分离获得1株革兰氏阴性细菌,编号为TC-1,采用PCR方法扩增16S rDNA、gyrB基因序列,将其亚克隆到pMD18-T载体中测序获得片段大小分别为1503 bp、989 bp,与GenBank中模式菌株弗氏柠檬酸杆菌Citrobacter freundii序列相似性分别为99.60%、98.80%;系统进化树分析显示,分离菌株与C.freundii自然聚为一支,最终鉴定分离菌株TC-1为弗氏柠檬酸杆菌;药敏试验显示,TC-1菌株对头孢哌酮、头孢他啶、萘啶酸、诺氟沙星、左氟沙星、四环素、氟苯尼考和亚胺培南等药物敏感,对阿莫西林、头孢氨苄、磺胺异恶唑和复方新诺明等耐药;人工回归感染试验显示,TC-1菌株对巴西龟有致病性,并与自然发病龟的临床症状基本一致。本研究结果可为龟类弗氏柠檬酸杆菌的分子诊断及防治提供参考依据。