BALB/c鼠肝脏枯否细胞不同分离培养方法的比较

摘要

目的 建立简便易行,存活好、产量和纯度高,稳定的枯否细胞(Kupffer Cell, KC)分离培养方法 .方法 根据酶消化时间不同和裂解红细胞的方法 在酶消化之后和之前分方法 Ⅰ和方法 Ⅱ.分别运用0.1%的Ⅱ型胶原酶、0.05%链酶蛋白酶E和0.005%DnaseⅠ在不同方法 中离体消化肝组织并进行密度梯度离心和贴壁培养提取KC,通过吞噬实验观察鉴定KC.结果 方法 Ⅰ和方法 Ⅱ中KC的数量分别是(0.71±0.21)×107/g和(0.96±0.20) ×107/g,细胞贴壁率分别40.1%、45.1%.用0.4%台盼蓝染色鉴定,存活率分别为90%、95%.吞噬实验发现,细胞纯度分别为90%、95%.结论 结合碾磨筛网滤过降低酶作用时间并在酶消化之前裂解红细胞分离提取枯否细胞具有存活好产量纯度高的优点.