随机引物PCR鉴定分枝杆菌的方法学研究

摘要

目的为了建立RAPD-PCR鉴定分枝杆菌的方法,同时了解其影响因素.方法采用不同引物及其浓度、不同DNA提取方法及其他反应条件进行随机引物PCR.结果分枝杆菌DNA提取后,-20 ℃ 30天内结果无影响.扩增的退火温度较低,对反应条件高度依赖.在研究中发现,实验条件的变化,可产生缺带现象,此时需要重复2次,如果3次扩增的指纹图谱相同,则可以确定.结论RAPD-PCR扩增条件的优化组合是获得稳定、可靠的分枝杆菌DNA指纹的关键.