长链非编码RNA Linc00645在脑胶质瘤中的表达及其功能研究

摘要

目的 研究长链非编码RNA Linc00645在脑胶质瘤组织中的表达水平及其对胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响,并探究其可能的作用机制。方法 分析癌症基因组图谱(TCGA-GBM)数据库和中国脑胶质瘤基因组计划(CGGA)数据库中,Linc00645在正常脑组织和胶质瘤组织中的表达情况,并采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)在人正常星形胶质细胞株和5种胶质瘤细胞株中检测Linc00645的表达水平。敲低Linc00645表达后,应用细胞增殖实验(MTT)检测胶质瘤细胞的增殖能力,应用划痕实验和Transwell侵袭实验检测细胞的迁移和侵袭能力。应用Western Blot实验在蛋白水平上验证敲低Linc00645的表达对胶质瘤细胞侵袭和迁移相关蛋白的影响。结果 Linc00645在脑胶质瘤中的表达水平明显高于正常脑(P<0.05),并且Linc00645的表达水平随着胶质瘤病理等级的升高而升高(P<0.05)。Linc00645高表达组的患者,总体生存期明显缩短,预后较差(P<0.05)。抑制Linc00645的表达后胶质瘤细胞的增殖、侵袭以及迁移能力均明显下降。基因表达相关性(Pearson)分析显示上皮-间质样转化(EMT-like)相关标志物N-钙黏蛋白(N-cadherin),波形蛋白(Vimentin)和锌指E-盒结合同源异形盒因子(ZEB1)与Linc00645表达呈正相关性,而E-钙黏蛋白(E-cadherin)与Linc00645表达呈负相关性(P<0.05)。敲低Linc00645的表达后细胞中的E-cadherin表达水平升高,而N-cadherin、Vimentin和ZEB1表达水平明显降低。结论 长链非编码RNA Linc00645在胶质瘤组织中高表达,并且其表达水平与肿瘤的恶性程度密切相关。Linc00645可能通过升高N-cadherin、Vimentin和ZEB1的表达水平从而提高胶质瘤细胞的侵袭和迁移能力。Linc00645可能作为胶质瘤早期诊断和治疗的新靶点。