桃红四物汤对系膜增生性肾小球肾炎大鼠肾脏的保护及ERK1/2/HIF-1α信号通路的影响

摘要

目的探讨桃红四物汤对膜增生性肾小球肾炎(mesangial proliferative glomerulonephritis,MsPGN)大鼠的治疗作用及对细胞外信号调控蛋白激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase1/2,ERK1/2)/缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)信号通路的调控作用。方法取SD大鼠72只,按随机数字表法分为正常对照组、模型组、桃红四物汤低(4.5 g/kg)、中(9 g/kg)、高(18 g/kg)剂量组、阳性对照组(醋酸泼尼松,5 mg/kg),每组12只;除正常对照组外,其余各组均经皮下注射牛血清白蛋白建立大鼠MsPGN模型,并于造模成功后开始灌胃给药,各组均连续给药28 d,1次/d。末次给药结束24 h后,观察大鼠一般行为变化,收集尿液检测24 h尿蛋白;酶联免疫吸附法检测血肌酐(serum creatinine,Scr)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平;透射电镜观察肾小球系膜区增生情况;高碘酸-无色品红染色法(PAS染色法)观察肾小球系膜细胞外基质增生状况;免疫荧光染色法检测免疫球蛋白M(immuroglobulin M,IgM)、纤维化指标-IV胶原蛋白(IV Collagen,Col-IV)在肾组织中表达;免疫组化法检测ERK1/2、HIF-1α在肾组织中表达;蛋白质印迹法分别检测肾组织ERK1/2及磷酸化ERK1/2(phosphorylated ERK1/2,p-ERK1/2)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)表达情况。结果与正常对照组相比,模型组大鼠肾小球系膜区电子致密物沉积、肾小球上皮细胞足突肿胀、肾小球基底膜增厚及不规则排列严重,24 h尿蛋白、Scr、BUN水平、IgM及Col-IV沉积、ERK1/2及HIF-1α阳性表达、p-ERK1/2/ERK1/2、MMP-9、TNF-α及IL-6蛋白表达升高(P0.05)。结论桃红四物汤可能通过抑制ERK1/2/HIF-1α通路激活,降低肾脏炎症反应及纤维化过程,改善MsPGN大鼠的肾损伤。