促红细胞生成素抑制过氧化氢诱导的肾小管细胞凋亡

摘要

目的 探讨促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)是否可以抑制过氧化氢(H2O2)诱导的氧化应激和细胞凋亡及其抑制凋亡的相关机制.方法 传代培养大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK-52E),分为正常对照组(NC组)、H1组(1 mmol/L H2O2)、H2组(5 mmol/L H2O2)、E组(H2O2+EPO组).细胞免疫荧光检测NRK-52E细胞是否表达EPO受体(erythropoietin receptor,EPOR).荧光探针氯甲基二氯二氢荧光素二乙酯(CM-H2DCFDA)标记检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平.流式细胞仪Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡指数.RT-PCR检测凋亡相关基因B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma/Leukemia-2,Bcl-2)家族中Bcl-2和Bax mRNA的表达.结果 NRK-52E细胞表达EPOR.H2O2引起NRK-52E细胞内ROS水平升高,上调BaxmRNA表达、下调Bcl-2 mRNA表达,诱导NRK-52E细胞凋亡.EPO可以抑制H2O2诱导的ROS水平升高、Bcl-2 mRNA表达下调、Bax mRNA表达上调及NRK-52E细胞凋亡.结论 EPO可以缓解H2O2诱导的氧化应激、上调Bcl-2 mRNA表达、下凋Bax mRNA表达,抑制H2O2诱导的NRK-52E细胞凋亡,发挥肾小管细胞保护效应.