黄芪桂枝五物汤防治深静脉血栓形成模型大鼠的实验研究

摘要

目的探讨黄芪桂枝五物汤防治深静脉血栓形成(DVT)模型大鼠的作用机制。方法将40只无特定病原体(SPF)级SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、中药组及肝素钙组,每组10只。除假手术组外,其他3组均构建不完全结扎的大鼠股静脉血栓模型。中药组采用黄芪桂枝五物汤冻干粉溶液2.0 g/(kg·d)灌胃;肝素钙组采用低分子量肝素钙351.43 IU/(kg·d)皮下注射;假手术组、模型组均以蒸馏水灌胃;各组大鼠给药时间均为造模前7 d至造模后7 d,给药1次/d,持续给药14 d。治疗后取各组大鼠腹主动脉血,检测活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体(D-D)等凝血指标,并进行血浆代谢产物分析;取各组大鼠股静脉段,观察静脉血栓形成段的组织形态学差异。结果与假手术组比较,模型组大鼠FIB及D-D水平均升高,APTT、PT、TT均缩短,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,肝素钙组、中药组FIB及D-D水平均下降,APTT、PT、TT均延长,差异有统计学意义(P<0.05);与肝素钙组比较,中药组D-D水平更低,差异有统计学意义(P<0.05)。血浆代谢产物分析显示,模型组与假手术组共筛选出27种差异代谢物;黄芪桂枝五物汤可以使14种差异代谢物显著回调,主要涉及改善维生素K、三甲基胺氮氧化物(TMAO)、鹅肌肽、L-肌肽、肉碱代谢、胆汁酸代谢和脂代谢等;低分子量肝素钙可以使8种差异代谢物显著回调,主要涉及TMAO、鹅肌肽、L-肌肽、肉碱代谢以及氨基酸代谢等。组织形态学结果显示,假手术组静脉管腔中无血栓形成;模型组中静脉管腔被血栓填塞,炎性细胞浸润较为严重;肝素钙组静脉管腔内部分血栓崩解,部分血栓收缩,炎性细胞浸润较模型组轻;中药组静脉管腔内血栓大部分崩解消失,残留少量血栓收缩,管壁炎性细胞浸润较轻,提示病理损害程度较轻。结论黄芪桂枝五物汤具有抗凝、改善代谢紊乱、抑制血栓形成、保护血管内皮细胞以及减轻炎性细胞浸润等作用,这可能是其治疗DVT的重要机制。