曲美他嗪对人脑血管平滑肌细胞增殖、迁移及活性氧表达的影响及其机制

摘要

目的 探讨曲美他嗪(TMZ)对人脑血管平滑肌细胞(HBVSMCs)增殖、迁移及活性氧(ROS)表达的影响及其机制.方法 选用生长状况良好的对数生长期HBVSMCs分两部分进行实验,A实验:将HBVSMCs分为5组,对照组:不处理;血小板衍生生长因子(PDGF)组:加入10 ng/ml PDGF;0.2μmol/L、1.0μmol/L和5.0μmol/L TMZ组:在给予PDGF基础上,分别加入终浓度为0.2μmol/L、1.0μmol/L和5.0μmol/L TMZ.B实验:将HBVSMCs分为5组,对照组:不处理;PDGF组:给予10 ng/ml PDGF;TMZ组:在给予PDGF基础上,加入浓度为5.0μmol/L TMZ;XAV939组:在给予PDGF基础上,加入浓度为2.0μmol/L XAV939;TMZ+XAV939组:在给予PDGF基础上,加入5.0μmol/L TMZ和2.0μmol/L XAV939共同处理.采用噻唑蓝法、划痕实验、二氯荧光素法分别检测各组HBVSMCs的增殖活力、迁移率及ROS表达水平,采用蛋白质免疫印迹法检测HBVSMCs中Wnt/β-连环蛋白(catenin)信号通路相关蛋白β-catenin、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶(MMP)-9及原癌基因蛋白质(c-Myc)的表达水平.结果 A实验中,对照组、PDGF组、0.2μmol/L TMZ组、1.0μmol/L TMZ组、5.0μmol/L TMZ组HBVSMCs的OD值、迁移率、ROS、β-catenin、Cyclin D1、MMP-9及c-Myc表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中PDGF组上述指标均高于对照组,各浓度TMZ组上述指标均低于PDGF组,且呈浓度依赖性降低(P<0.05).B实验中,对照组、PDGF组、TMZ组、XAV939组、TMZ+XAV939组HBVSMCs的OD值、迁移率及ROS表达水平比较差异均有统计学意义(P<0.05),其中PDGF组上述指标均高于对照组;TMZ组和XAV939组上述指标均低于PDGF组;TMZ+XAV939组上述指标均低于TMZ组(P<0.05).结论 TMZ可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路活化抑制HBVSMCs增殖、迁移及ROS表达.