腺病毒介导的人突变p27基因转染对人大肠癌细胞系的作用

摘要

目的用人重组p27mt腺病毒感染大肠癌细胞株SW480,研究p27mt对大肠癌细胞的抑制作用.方法用重组腺病毒Ad-p27mt转染SW480后,用Western blot检测目的基因的表达;用流式细胞仪对转染细胞进行倍体分析,绘制生长曲线观察对细胞的生长抑制作用.结果 Ad-p27mt转染SW480后,通过Western blot分析发现p27在细胞中出现了高表达;PI染色流式细胞仪检测,77.9%的细胞阻滞于G0/G1期,而Ad-LacZ组及空白对照组分别为25.57%和25.29%(P＜0.001);由生长曲线可以看出Ad-p27mt于24h内对细胞就有明显的抑制作用(P＜0.05),且持续时间长.结论重组腺病毒能够有效转染p27mt 基因进入SW480细胞内并获得了高表达;p27mt对细胞周期有明显的阻滞作用且对细胞的生长有明显的抑制作用.突变p27是一种细胞周期高效阻滞因子和高效生长抑制因子,为p27基因治疗大肠癌开辟了一条新途径.