红背叶根体外抑制HCV亚基因复制子RNA表达活性部位筛选研究

摘要

目的:筛选红背叶根体外抑制丙型肝炎病毒(HCV)复制的活性部位。方法:以HCV亚基因复制子体外培养体系CBRH7919(Jneo3-5B)为HCV复制模型,选用干扰素α联合利巴韦林为阳性对照药物,观察不同浓度红背叶根总提取物、石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位的抗HCV作用。采用荧光定量PCR检测HCV亚基因复制子RNA拷贝数,通过Western blot检测HCV功能蛋白NS3的表达,采用CCK-8法观察药物对细胞生长的影响。结果:红背叶根4种提取物中,乙酸乙酯部位对HCVRNA复制的抑制活性最强,对NS3蛋白表达有明显干预作用,对HCVRNA表达表现出剂量依赖的抑制作用(P<0.05)。其比活较初始总提取物提高5.71倍,对HCVRNA半数抑制浓度为14.60mg/L,对CBRH7919(Jneo3-5B)细胞半数细胞毒性浓度为40.30mg/L,治疗指数为2.76。结论:红背叶根乙酸乙酯部位可抑制HCV的复制,为抗HCVRNA表达的活性部位,在抗HCV方面有着潜在的用途。