氨基乙酰丙酸光动力疗法清除的混合淋巴细胞杀伤作用研究

摘要

目的对氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinic acid,ALA)光动力疗法(ALA-PDT)清除激活淋巴细胞的机制以及ALA-PDT处理后的混合淋巴细胞对同种异体淋巴细胞及白血病细胞的杀伤作用进行研究.方法将同种异体外周血单个核细胞按单向混合淋巴细胞培养方法制备单向混合淋巴细胞(MLC细胞).对MLC细胞进行ALA-PDT处理后,将其与制备MLC细胞时使用的刺激细胞、第三方正常人PBMCs以及K562细胞、HL60细胞1:1混合培养48h.MTT比色法检测细胞活性,并计算ALA-PDT处理后的MLC细胞对不同细胞的杀伤率.用流式细胞仪检测ALA-PDT处理对MLC细胞的杀伤情况.结果ALA-PDT处理后的MLC细胞对刺激细胞的杀伤率明显低于第三方正常人PB-MCs、K562细胞和HL60细胞的杀伤率,分别为32.4%±1.16%比78.1%±0.952%、75.5%±2.40%和77.0%±1.13%(P＜0.001),ALA-PDT处理后的MLC细胞对HL60细胞、第三方正常人PBMCs、K562细胞之间也存在差异.ALA-PDT清除激活淋巴细胞以凋亡为主.结论ALA-PDT可能通过诱导细胞凋亡选择性清除同种异体激活的淋巴细胞,使针对同种异体、淋巴细胞介导的排斥反应减轻,同时也保留了对第三方正常人PBMCs以及肿瘤细胞的杀伤特性.