角膜不同保存方法与术后免疫排斥反应相关性的实验研究

摘要

目的:探讨角膜保存时间与术后免疫排斥反应的关系,检测角膜植片的细胞间黏附因子1(ICAM-1)表达及房水、血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量与角膜移植排斥反应的关系.方法:先选用Wistar大鼠15只30只眼随机分3组(每组10只眼),分别用不同方法保存,即:湿房保存12 h,中期保存液保存7 d,深低温长期保存12周.再选用SD大鼠30只30只眼(右眼)作为受体,分别使用上述不同保存方法的Wistar大鼠眼作为供体建立角膜移植排斥反应动物模型.将SD大鼠随机分3组每组10只眼:Ⅰ组(异体湿房保存组);Ⅱ组(异体中期保存组);Ⅲ组(异体长期保存组).观察各组角膜移植术后排斥反应指数(RI)、植片存活时间(MST)和植片的病理变化.HE染色及免疫组化染色观察免疫排斥反应的程度及ICAM-1表达程度.采用酶联免疫吸附试验检测各组大鼠角膜移植术后10 d时房水、血清中TNF-α含量变化.结果:Ⅲ组RI明显降低,MST明显延长,与其他两组比较均差异十分显著(P＜0.01).角膜移植术后10 d时HE染色显示Ⅲ组炎性反应较Ⅰ组、Ⅱ组明显减轻,免疫组化染色显示Ⅲ组ICAM-l表达较Ⅰ组、Ⅱ组明显减少.Ⅲ组眶血清及房水中TNF-α含量明显低于Ⅱ组和Ⅰ组,差异十分显著(P＜0.01).结论:深低温保存的大鼠角膜移植术后免疫排斥反应发生率降低,发生时间延迟.ICAM-1和TNF-α是角膜移植免疫排斥反应发生的重要因素之一.