重组里氏木霉液体深层发酵产中性内切-β-葡聚糖酶

摘要

中性内切-β-葡聚糖酶在纺织、食品和造纸等领域中应用广泛.研究采用一株重组里氏木霉(Trichoderma reesei)生产中性内切-β-葡聚糖酶,发酵液经SDS-PAGE检测,显示了来自特异腐质霉(Humicola insolens)内切-β-葡聚糖酶的蛋白条带(约52 kDa).对重组里氏木霉的发酵性能进行了研究,表明碳源对内切-β-葡聚糖酶的形成有重要影响,当采用乳糖与微晶纤维素的复合碳源时,酶活力和产率都可明显提高.利用玉米浆粉作为氮源,其适宜浓度为12g.L-1.培养基初始pH值对发酵酶活力及产率有一定影响,适宜的初始pH值为5.0.在2 m3的发酵罐进行产酶试验,发酵96 h酶活可高达8012 U.mL-1.酶学性质研究表明:该酶在50℃以下稳定,在45～55℃有明显的催化作用,其最适催化温度为50℃.在pH 5.0～7.0稳定性较好,并且有明显的催化作用,其最适催化pH值为6.0.生物整理实验结果显示重组里氏木霉所产酶液用于牛仔布水洗时反染较少,水洗效果良好.