缬草放线菌中卤代酶类抗生素的筛选及遗传转化系统的建立

摘要

目的:从基因水平上挖掘新的卤代酶类抗生素.方法:利用简并引物快速筛选缬草放线菌中含卤代酶类抗生素的目标菌株,并对其进行鉴定.选择萘啶酮酸、氯霉素、潮霉素、卡那霉素、红霉素、庆大霉素、阿普霉素等7种抗生素进行抗生素敏感试验,选择目标菌株的最适抗生素及其最适浓度,构建遗传转化系统.结果:从145株缬草放线菌中筛选到1株含卤代酶类抗生素生物合成基因的菌株AJ56,经鉴定其为链霉菌,在最适抗生素萘啶酮酸和阿普霉素的培养基中构建遗传转化系统,经多次传代,成功构建了菌株AJ56与大肠杆菌S17-1/pSET152遗传转化系统.结论:菌株AJ56遗传转化系统的成功构建为进一步研究其次级代谢产物提供了基础.