七厘散含药血清对大鼠骨膜间质干细胞Wnt/β-catenin信号通路表达的影响

摘要

目的 探讨七厘散含药血清促进骨膜间质干细胞(BMSC)的增殖和成骨分化以及与Wnt/β-catenin信号通路的关系.方法 SD大鼠0.5 g ? kg-1七厘散灌服,灌胃6h制得含药血清;取幼龄SD大鼠骨膜通过密度梯度离心法分离纯化制备骨膜间质干细胞(BMSC),以制备所得的七厘散含药血清用于给药.实验分为正常组,含药血清组,ICG001-1组(5 μM),ICG001-2组(25 μM)组;在第1、2、3、7、14天时,以MTT法检测细胞增殖情况;酶联免疫法(ELISA)检测BMSC细胞内了碱性磷酸酶(ALP)活性;利用PT-PCR法检测Runx2,Osteocalcin,β-catenin,Wnt4a,Wnt7基因表达;通过Western blot法检测Wnt/β-catenin信号通路的相关蛋白.结果 七厘散含药血清组促进了BMSC增殖并提高了ALP的活性,促进Runx2,Osteocalcin,β-catenin,Wnt4a,Wnt7基因及其相应蛋白的表达,且七厘散含药血清组激活了Wnt/β-catenin通路,但这些作用能够被ICG001废除.结论 七厘散能够通过调控Wnt/β-catenin信号通路来促进骨髓间质干细胞的增殖和成骨分化.