骨髓间质干细胞

摘要： 目的:探讨七厘散对膝骨关节炎(KOA)兔的治疗作用及与Wnt/β-catenin信号通路的关系.方法:将清洁级新西兰兔20只随机分为对照组和七厘散组(n=10),雌雄各取5只.七厘散组采取2％木瓜蛋白酶溶液关节腔注射及复合强迫屈曲位法构建兔膝关节骨性关节炎(KOA)模型;造模结束后七厘散组兔进行灌胃七厘散(0.25 g/kg),对照组兔给予相同体积的生理盐水,连续14 d.治疗前后对所有兔行右后肢X线拍摄,采用免疫组化法检测家兔软骨组织中Wnt4 a的表达情况;取5只幼龄SD大鼠骨膜通过密度梯度离心法分离纯化制备骨膜间质干细胞(BMSC),再取另外5只灌胃七厘散后6 h取血制备含药血清,制备所得的七厘散含药血清用于给药.实验分为正常组,七厘散血清组,DKK-1组(0.1μg/kg),DKK-1组(0.2μg/kg);在第1、2、3、7、14天时,通过MTT法检测细胞增殖情况,利用RT-PCR法检测Runx2,Osteocalcin,β-catenin,Wnt4a基因的表达.结果:七厘散治疗后,七厘散组兔膝关节表面恢复光滑,少数软骨下骨出行高密度影;七厘散含药血清组促进了BMSCs增殖,增加Runx2、Osteocalcin、β-catenin,Wnt4a基因的表达;免疫组织化学染色观察显示,与治疗前相比,七厘散治疗后Wnt4a表达量明显增加.结论:七厘散能够通过调控Wnt/β-catenin信号通路促进骨髓间质干细胞的增殖从而改善兔膝骨关节炎.

摘要： 目的 探讨七厘散含药血清促进骨膜间质干细胞(BMSC)的增殖和成骨分化以及与Wnt/β-catenin信号通路的关系.方法 SD大鼠0.5 g ? kg-1七厘散灌服,灌胃6h制得含药血清;取幼龄SD大鼠骨膜通过密度梯度离心法分离纯化制备骨膜间质干细胞(BMSC),以制备所得的七厘散含药血清用于给药.实验分为正常组,含药血清组,ICG001-1组(5 μM),ICG001-2组(25 μM)组;在第1、2、3、7、14天时,以MTT法检测细胞增殖情况;酶联免疫法(ELISA)检测BMSC细胞内了碱性磷酸酶(ALP)活性;利用PT-PCR法检测Runx2,Osteocalcin,β-catenin,Wnt4a,Wnt7基因表达;通过Western blot法检测Wnt/β-catenin信号通路的相关蛋白.结果 七厘散含药血清组促进了BMSC增殖并提高了ALP的活性,促进Runx2,Osteocalcin,β-catenin,Wnt4a,Wnt7基因及其相应蛋白的表达,且七厘散含药血清组激活了Wnt/β-catenin通路,但这些作用能够被ICG001废除.结论 七厘散能够通过调控Wnt/β-catenin信号通路来促进骨髓间质干细胞的增殖和成骨分化.

摘要： 目的 探讨骨髓间质干细胞(BMSCs)移植联合超声介入治疗犬急性脑梗死模型的价值.方法 18只杂种犬,犬龄6～10年,体重5～20 kg,所有犬均建立急性脑梗死模型,随机数字表法平分为3组-模型组、介入组、干细胞组,介入组给予超声介入治疗,干细胞组给予BMSCs移植联合超声介入治疗,模型组不进行任何治疗处理.观察比较3组治疗第2周与第4周的mNSS神经功能评分、凝血酶原时间(PT)与纤维蛋白原(FIB);评价3组治疗第4周的脑血管造影总有效率;测定3组治疗第4周的海马组织Caspase-3、Bax蛋白相对表达水平.结果 介入组、干细胞组治疗第2周与第4周的mNSS神经功能评分均低于模型组,且干细胞组低于介入组,差异均有统计学意义(P0.05).模型组、介入组、干细胞组治疗第4周的脑血管造影总有效率分别为100.0％、50.0％和16.7％,干细胞组总有效率显著低于模型组、介入组,差异有统计学意义(P<0.05).介入组、干细胞组治疗第4周的海马组织Caspase-3、Bax蛋白相对表达水平低于模型组,且干细胞组低于介入组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 BMSCs移植联合超声介入治疗犬急性脑梗死能抑制海马组织细胞凋亡,且不会影响犬的凝血及纤溶状况,从而可提高总体治疗效果,改善神经功能状况.

摘要： 目的 绿色荧光蛋白(GFP)基因转染标记版纳微型猪骨髓间充质干细胞(pBMSC),分析GFP转染对pBMSC增殖和成脂分化的影响.方法 以不同剂量携带GFP基因慢病毒共培养的方法转染标记pBMSC,以hUCMSC为对照,流式分析方法检测不同细胞GFP的阳性率,CCK-8法检测转染细胞的增殖活性.观察GFP标记的pBMSC成脂分化诱导后的脂滴形成,异丙醇溶解脂滴,测定各组光密度值并进行比较分析.结果 以MOI为50和100的病毒载体剂量共培养72 h,可以成功标记pBMSC,MOI为50时pBMSC的GFP阳性率明显低于hUCMSC的GFP阳性率(P＜0.01).转染GFP的pBMSC生长曲线依然呈现“S”的分布特征,总体趋势与hUCMSC相似.不同GFP阳性率的pBMSC和hUCMSC成脂分化后脂滴溶解液OD值没有显著差异(P＞0.05).结论 GFP转染可以标记近交系版纳微型猪来源的pBMSC,但不会显著影响其增殖和成脂分化.

摘要： 目的 探讨大鼠骨髓间质干细胞横向分化为肝细胞的过程中,八聚体转录因子4(Oct4)启动子甲基化的调控机制.方法 体外诱导大鼠骨髓源性肝干细胞(RBMLSC)向肝细胞横向分化,于不同时间点(0 d、7 d、14 d)提取细胞的DNA及RNA.用荧光定量PCR法检测白蛋白(ALB)和Oct4的mRNA表达水平,再用焦磷酸测序法检测Oct4基因启动子中4个CpG位点的甲基化变化.结果 细胞分化过程中,与0 d组相比,7 d组和14 d组的ALB mRNA分别增加5.22倍(P<0.05)和14.7倍(P<0.001),而Oct4 mRNA分别下降0.23倍(P<0.01)和0.055倍(P<0.001);同时Oct4启动子的CpG1、CpG2、CpG3甲基化频率显著上升,7 d组均明显高于对照组和0 d组(P<0.01),14 d组又均明显高于对照组、0 d组及7 d组(P<0.01),但CpG 4甲基化无明显变化.结论 细胞诱导分化过程中,Oct4启动子高甲基化,导致其mRNA表达减少,从而RBMLSC多能性消失.

摘要： 目的 构建携带缺氧诱导因子-1α(Hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的慢病毒载体pLVX-HIF-1α-IRES-ZsGreen1,并转染骨髓间充质干细胞(Bone marrow derived stem cells,BMSCs),检测该慢病毒载体在BMSCs的表达.方法 从Puc-57-HIF-1α载体中扩增出HIF-1α基因片段,将HIF-1α基因片段与载体连接,获得慢病毒载体pLVX-HIF-1α-IRES-ZsGreen1,将其与慢病毒包装系统共同转染到293T细胞内进行病毒包装,通过观察报告基因绿色荧光蛋白的表达来测定病毒滴度.将pLVX-HIF-1α-IRES-ZsGreen1转染到BMSCs细胞内,通过Real-Time PCR和CCK-8法分别检测HIF-1αmRNA表达及BMSCs增殖能力.结果 PCR及测序结果显示慢病毒载体pLVX-HIF-1α-IRES-ZsGreen1构建正确,病毒滴度为3×108 TU/mL.pLVX-HIF-1α-IRES-ZsGreen1转染BMSCs后,BMSCs中HIF-1αmRNA表达水平及BMSCs细胞增殖能力明显高于非转染组(P<0.05).结论 成功构建HIF-1α基因慢病毒载体pLVX-HIF-1α-IRES-ZsGreen1,该慢病毒载体可以介导HIF-1α基因在BMSCs中稳定表达,并提高BMSCs增殖能力.

摘要： 背景:聚多巴胺仿生法被证实可在多种不同金属表面制备羟基磷灰石涂层,但目前缺乏利用其在人工合成材料表面制备羟基磷灰石涂层的研究。目的:利用聚多巴胺仿生法在纳米羟基磷灰石/聚酰胺66表面制备羟基磷灰石涂层,评价其对骨髓间质干细胞生物学的影响。方法:采用聚多巴胺仿生法在纳米羟基磷灰石/聚酰胺66表面制备羟基磷灰石涂层,获得羟基磷灰石-聚多巴胺-纳米羟基磷灰石/聚酰胺66(hydroxyapatite-polydopamine-nano-hydroxyapatite/polyamide66,HA-PDA-HA/P66)材料,通过X射线光电子能谱分析和扫描电镜检测羟基磷灰石涂层,并检测材料的表面粗糙度及亲水性。将骨髓间质干细胞C3H10T1/2分别与纳米羟基磷灰石/聚酰胺66、聚多巴胺-纳米羟基磷灰石/聚酰胺66、HA-PDA-HA/P66材料共培养,培养6,12 h后,采用CCK-8法检测细胞黏附情况;培养1 d,通过扫描电镜观察细胞形态;培养1,3 d,DAPI染色检测细胞增殖;成骨诱导培养7,10 d,检测细胞碱性磷酸酶活性;成骨诱导培养14 d,茜素红染色检测细胞矿化能力。结果与结论:①X射线衍射和扫描电镜证实成功制备了羟基磷灰石涂层,且羟基磷灰石涂层明显提高了材料亲水性和表面粗糙度;②培养6,12 h,HA-PDA-HA/P66材料表面黏附的细胞数明显多于其余两种材料(P<0.05);培养1 d,在HA-PDA-HA/P66及聚多巴胺-纳米羟基磷灰石/聚酰胺66材料上的细胞呈多边形,且有较多伪足;培养1,3 d,HA-PDA-HA/P66材料表面的细胞增殖能力高于其余两种材料(P<0.05);④成骨诱导7,10 d,HA-PDA-HA/P66材料表面细胞内碱性磷酸酶活性高于其余两种材料(P<0.05);成骨诱导14 d,HA-PDA-HA/P66材料周围钙结节形成多于其余两种材料;⑤结果表明,利用聚多巴胺仿生法可在纳米羟基磷灰石/聚酰胺66表面制备羟基磷灰石涂层,且涂层具有良好的生物活性与生物相容性。

摘要： 背景:聚多巴胺仿生法被证实可在多种不同金属表面制备羟基磷灰石涂层,但目前缺乏利用其在人工合成材料表面制备羟基磷灰石涂层的研究.目的:利用聚多巴胺仿生法在纳米羟基磷灰石/聚酰胺66表面制备羟基磷灰石涂层,评价其对骨髓间质干细胞生物学的影响.方法:采用聚多巴胺仿生法在纳米羟基磷灰石/聚酰胺66表面制备羟基磷灰石涂层,获得羟基磷灰石-聚多巴胺-纳米羟基磷灰石/聚酰胺66(hydroxyapatite-polydopamine-nano-hydroxyapatite/polyamide66,HA-PDA-HA/P66)材料,通过X射线光电子能谱分析和扫描电镜检测羟基磷灰石涂层,并检测材料的表面粗糙度及亲水性.将骨髓间质干细胞C3H10T1/2分别与纳米羟基磷灰石/聚酰胺66、聚多巴胺-纳米羟基磷灰石/聚酰胺66、HA-PDA-HA/P66材料共培养,培养6,12 h后,采用CCK-8法检测细胞黏附情况;培养1 d,通过扫描电镜观察细胞形态;培养1,3 d,DAPI染色检测细胞增殖;成骨诱导培养7,10 d,检测细胞碱性磷酸酶活性;成骨诱导培养14 d,茜素红染色检测细胞矿化能力.结果与结论:①X射线衍射和扫描电镜证实成功制备了羟基磷灰石涂层,且羟基磷灰石涂层明显提高了材料亲水性和表面粗糙度;②培养6,12 h,HA-PDA-HA/P66材料表面黏附的细胞数明显多于其余两种材料(P<0.05);培养1 d,在HA-PDA-HA/P66及聚多巴胺-纳米羟基磷灰石/聚酰胺66材料上的细胞呈多边形,且有较多伪足;培养1,3 d,HA-PDA-HA/P66材料表面的细胞增殖能力高于其余两种材料(P<0.05);④成骨诱导7,10 d,HA-PDA-HA/P66材料表面细胞内碱性磷酸酶活性高于其余两种材料(P<0.05);成骨诱导14 d,HA-PDA-HA/P66材料周围钙结节形成多于其余两种材料;⑤结果表明,利用聚多巴胺仿生法可在纳米羟基磷灰石/聚酰胺66表面制备羟基磷灰石涂层,且涂层具有良好的生物活性与生物相容性.

摘要： 目的 探究鸢尾素(Irisin)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)Sost基因表达及成骨分化的影响.方法 设置Irisin不同浓度组(0、80、100、120 ng/mL),细胞计数试剂盒(CCK-8)法选择Irisin的最佳实验浓度.用含有Irisin的培养液培养大鼠BMSC设置为实验组,对照组为单纯培养液培养,3、7、14 d进行茜素红、von Kossa钙盐染色;3、10 d采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western bolt检测成骨相关基因mRNA及蛋白表达.分别采用单因素方差分析和t检验对数据进行统计分析.结果 (1)培养3 d时,100 ng/mL的Irisin促进大鼠BMSC增殖的效果明显(OD=0.951),与对照组相比差异有统计学意义(F=102.52,P<0.05);(2)实验组染色深度、钙结节大小和数量都明显高于对照组;(3)与对照组相比,实验组Sost mRNA及其蛋白表达水平明显下降,ALP、Lrp5、BMP2、Smad1的mRNA及其蛋白表达水平明显增高,差异均有统计学意义(P<0.001).结论 (1)Irisin可抑制Sost基因的表达;(2)Irisin可在体外促进大鼠BMSC增殖和成骨分化;(3)Wnt和BMP信号通路可能在Irisin促进大鼠BMSC成骨分化中发挥作用.

摘要： 锁阳为锁阳科锁阳属植物锁阳CynomoriumsongaricumRupr。干燥内质茎,常寄生于蒺藜科白刺属(NatrariaL.)植物根上,生于沙漠地带,主产于中国西北地区。锁阳在中、蒙药中是常用药,具补肾、助阳、益精、润肠之功效。近年研究发现,锁阳能够促进人体细胞再生和新陈代谢,增强免疫调节功能,具有明显的抗癌抗毒、延缓衰老的作用。因而探讨锁阳含药血清体外定向诱导骨髓间质干细胞向神经细胞分化的方法对骨髓间质干细胞替代疗法的研究具有积极的意义。通过在无菌条件下取SD大鼠股骨骨髓细胞做原代培养,根据贴壁培养筛选法体外传代、增殖和纯化MSCs的研究中发现,当细胞传至第三代后,利用锁阳含药血清定向诱导骨髓间质干细胞进行体外诱导,可以诱导骨髓间质干细胞向神经元转化。观察分化过程中以免疫细胞化学法中神经细胞标志Nestin、MAP-2、GFAP的表达来检测细胞种类、形态以及数目的变化，应用流式细胞仪观察细胞增殖周期，并计算转化率。观察发现锁阳含药血清诱导后，MSCs能分化为具有典型神经元形态的细胞并明显表达Nestin、MAP-2，而GFAP的表达量并无增高趋势。其中空白血清组的诱导效果明显低于含药血清组(P<0.05);低剂量组与高剂量组之间的差别有统计学意义(P <0.05)。因此得出结论:体外分离和培养骨髓间质干细胞可通过贴壁法培养，锁阳含药血清具有诱导骨髓间质干细胞向神经细胞分化的作用。

摘要： 目的：探讨骨髓间质干细胞静脉注射移植对急性脊髓损伤大鼠神经功能恢复及Nogo-A、SYN表达的影响.方法：体外分离、培养、鉴定大鼠骨髓间充质干细胞,取SD大鼠96只,雌雄不限,随机分4组(n=24),假手术组(只切除椎板)、阳性对照组、阴性对照组和干细胞移植组.改良Allen打击法建立急性脊髓损伤模型,损伤7天后经尾静脉分别将PBS缓冲液和大鼠骨髓间充质干细胞注入阴性对照组和干细胞移植组.注射后1天、3天、7天、14天,应用BBB评分法评价治疗前后损伤大鼠运动功能改善状况及免疫组织化学技术检测损伤大鼠Nogo-A及SYN的表达,移植术后14天,应用光镜及电子显微镜观察损伤脊髓组织形态学变化.结果：各组损伤大鼠的运动功能均有不同程度的恢复.结论:骨髓间充质干细胞静脉移植后在宿主体内可透过血脑屏障，抑制局部脊做受损区域Nogo-A蛋白的表达，并且促进突触素(SYN)表达增加，有利于损伤大鼠脊翻结构修复及其运动功能改善。

摘要： 目的：通过静脉内注射移植骨髓间质干细胞，联合口服中成药通冠胶囊，观察骨髓间质干细胞移植联合通冠胶囊是否能协同促进干细胞的定位、分化和血管形成，进一步改善心梗后心功能。rn 方法：以大鼠为研究对象，通过手术结扎冠状动脉前降支的方法，建立大鼠急性心肌梗死动物模型。在大鼠急性心肌梗死后经尾静脉移植骨髓间质干细胞并喂灌通冠胶囊。于干细胞移植后6周，观察大鼠心脏重量指数，心脏彩超，梗死区、边缘区微血管计数、心肌绌胞计数。rn 结果：①干细胞组与干细胞+通冠组心脏重量及心脏重量指数与对照组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。②实验各组VEGF蛋白表达评分与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)，干细胞组VEGF蛋白表达评分与干细胞+通冠组比，差异有统计学意义(P<0.05)。③实验各组EF、LVFS、LVEd、LVEs均无统计学差异。rn 结论：经静脉内移植骨髓间质干细胞，联合口服中成药通冠胶囊可减轻心肌梗死后左心室重构，增加心肌血管数量，增加梗死区及梗死边缘区心肌细胞数，减少心肌细胞凋亡。

摘要： 研究发现全骨髓贴壁法可分离骨髓间充质干细胞，Hayley等进一步研究证实该方法可成功分离小鼠骨髓间充质干细胞，本研究在此基础上通过连续半换液法在体外培养12天后获得较高融合度的原代梭形贴壁生长细胞，传代培养后细胞仍保持良好的贴壁生长特性及梭形形态，经流式细胞技术检测结果表明该贴壁细胞高表达表型分子CD45、CD90，极低表达CD34、CD44，可认为本研究中梭形贴壁细胞为骨髓间充质干细胞，进一步MTT实验结果提示细胞活力增殖较好，较Li等人的研究结果，本研究不仅成功实现了对骨髓间充质干细胞分离、纯化，并在一定程度上缩减了原代细胞获取时间，可为后续研究提供质量、数量较为理想的种子细胞。故本研究中采用基因修饰方法，以腺病毒为载体将GDNF基因导入骨髓间充质干细胞后发现，当MOI=IOO转染72h后荧光显微镜观察发现Ad-rGDNF-GFP转染组中细胞可成功的表达GFP，同时细胞形态保持完好，并未出现病毒转染所产生的细胞“病变”效应；荧光定量PCR检测结果表明载rGDNF重组腺病毒转染BMSCs后细胞内源性GDNF表达水平较对照组明显提高，并具有统计学差异性，结合MTT结果发现，Ad-rGDNF-GFP转染组细胞内源性GDNF表达提高后，细胞活较力对照组显著提高，这些结果表明采用重组目的基因腺病毒并以合适的MOI转染方式，可在保持细胞较好活力的前提下持续性的提高靶细胞内源性GDNF目的基因的表达水品。进一步采用免疫荧光鉴定技术发现，Ad-rGDNF-GFP转染组中细胞于转染7d后表达神经元特异性标记物NSE，细胞胞体皱缩明显，伸出神经样细胞突触结构，而对照组中骨髓间充质干细胞NSE表达阴性，且细胞仍维持原梭形或成纤维样细胞形态，表明提高内源性GDNF基因表达水平可促进骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化。与采用神经营养因子蛋白诱导细胞分化相比较，采周基因修饰方法可提高靶细胞内源性目的基因表达水平，无需在诱导分化过程中添加外源性诱导剂，更有助于实现对靶细胞的持续、稳定性诱导分化作用，Yang S与Ye Y等研究发现富含GDNF等多种神经样因子的脑组织萃取物或脑脊液可诱导骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化，但诱导剂成分混杂，无法确定在骨髓间充质干细胞分化过程中起关键作用的因素，本研究中通过基因修饰方法提高细胞内源性GDNF基因表达水平后骨髓间充质干细胞可向神经样细胞自行分化，在明确分化关键因素基础上有助于对分化机制的进一步探索与研究。

摘要： 目的:探讨重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对脑出血大鼠神经功能的影响及机制.方法:实验大鼠随机分为模型组、rhG-CSF治疗组.利用大鼠脑立体定位仪、采用尾动脉取自体血法制做脑出血模型, rhG-CSF治疗组于造模后1h开始腹腔注射rhG-CSF(60μg/kg/d), 模型组注射等量生理盐水.在术后第7天及第14天分别进行神经功能评分,流式细胞仪检测外周血CD34+细胞的含量,免疫组化观察不同时间点脑出血灶周围组织微管相关蛋白2(MAP-2)的表达.结果:rhG-CSF治疗组在第7天及第14天的神经功能评分和外周血CD34+细胞含量及MAP-2表达均明显高于模型组(P＜0.05).结论:rhG-CSF可改善脑出血大鼠的神经功能,其机制可能是动员内源性骨髓间质干细胞通过血脑屏障转化为神经细胞替代坏死的神经细胞发挥作用的.

摘要： 目前，干细胞的研究主要集中在分离纯化、扩增技术和定向诱导分化等几个方面。本研究主要以北京鸭骨髓间充质干细胞(MSCs)作为研究对象，探索影响鸭MSCs分离、培养的各种因素，从而建立适于鸭MSCs生长的培养体系，并对其体外的定向诱导分化进行初步探索。

摘要： 目的: 以骨髓间质干细胞(bone mesenchymal stem cell,BMSC)为种子细胞,以海藻酸三维支架为载体,研究两者的相容性及其构建生物人工肝组织的可能性.方法: 将大鼠BMSC接种于海藻酸三维支架上,采用倒置相差显微镜、扫描电镜分别检测BMSC的黏附、生长与增殖情况,评价两者的相容性：同时以表皮生长因子(EGF)、肝细胞生长因子(HGF)、成纤维生长因子-4(FGF-4)等细胞因子混合液诱导BMSC向肝细胞分化,检测培养液内尿素氮和白蛋白含量的变化,RI-PCR检测培养细胞ALB和AFP基因的表达,糖原染色及免疫荧光法检测细胞糖原合成功能和CK-18的表达.结果: 大鼠BMSC在海藻酸三维支架上能正常地黏附、生长和增殖；于海藻酸三维支架内加入诱导液作用于BMSC后,培养液内尿素和ALB的含量逐渐上升,RT-PCR检测到培养细胞有AFP和ALB基因的表达,同时被诱导的细胞具有糖原储存的功能并表达CK-18.结论: 海藻酸三维支架与大鼠BMSC具有良好的相容性；以EGF、HGF、FGF-4等细胞因子混合液为诱导因子,能在海藻酸三维支架上成功诱导BMSC向肝细胞分化；海藻酸三维支架和BMSC可望成为肝脏组织工程理想的种子细胞和细胞载体.

摘要： 目的: 研究乙肝肝硬化患者骨髓间质干细胞(CIR-MSC)的生物学特性,为其临床应用提供依据.方法: 对比研究CIR-MSC和健康人MSC(ND-MSC)的生物学特性,主要包括细胞的增殖与凋亡、细胞的体内外致瘤性、细胞核型.结果:CIR-MSC不会感染HBV,CIR-MSC和ND-MSC均没有体内外致瘤性.CIR-MSC的增殖力明显低于ND-MSC,两者P2累积扩增率分别为(CIR-MSC vs.ND-MSC)6.7±0.8×103vs.24±3×103(P=0.01)；两者P3累积扩增率分别为(CIR-MSCvs.ND-MSC) 41±9×103 VS.210±61×103(P<0.001).CIR-MSC较易老化,CIR—MSC S期细胞比例明显低于ND-MSC,CIR-MSC早期凋亡的比例明显高于ND-MSC.CIR-MSC细胞表面因子PDGF-α(血小板来源的生长因子-α)、PDGF-β(血小板来源的生长因子-β)及IGF-1(胰岛素样生长因子1)受体的表达低于ND-MSC(P<0.05).结论:CIR-MSC的增殖能力受损,细胞容易出现老化及凋亡,细胞表面生长因子受体表达下降.乙肝肝硬化患者自体骨髓间质干细胞移植治疗肝硬化可能不是最佳选择.

摘要： 目的：探讨骨髓间质干细胞(mesemchymal stem cells，MSCs)体外定向分化为心肌样细胞。rn 方法：通过密度梯度离心和贴壁培养法分离大鼠骨髓间充质干细胞，连续传至第八代，经黄芪皂甙诱导后，在相差显微镜下观察形态变化和免疫组化、RT-PCR鉴定。rn 结果：原代细胞首先形成集落，传代细胞体积变大，诱导后细胞呈梭形，并出现肌管。免疫组化显示细胞表达结蛋白(Desmin)和心肌特异性肌钙蛋白I(cTnI)，RT-PCR显示有α-心肌肌球蛋白重链(α-MHC)和β-心肌肌球蛋白表达(β-MHC)。rn 结论：大鼠骨髓MSCs体外在黄芪皂甙作用下可定向分化为心肌样细胞，为应用MSCs治疗心肌损伤提供了动物试验依据。

摘要： 目的:急性胰腺炎(AP)是一种严重的急腹症,起病急,症状重,并发症多,可使多器官受损,如诊治不及时,病死率较高.临床上常规诊断AP通常依靠血液生化指标和CT来判断,往往存在漏诊或误诊现象.在AP发病较早期,仅合成于胰腺的腺泡细胞中的脂肪酶水平显著升高,具有较高特异性,因此被多数学者认为是AP早期诊断中的最佳指标.MRI分子影像技术能反映细胞水平的功能改变,但目前缺乏毒性低、特异性高的分子探针.本研究建立并验证大鼠AP模型,合成被脂肪酶酶解激活的含钆纳米粒作为MRI分子探针早期诊断AP.rn 方法:使用化学合成法合成特异脂肪酶响应的含锐纳米粒Gd-DTPA-FA，采用tH NMR}质谱分析、红外干涉光谱仪、辐射仪(IRIS)和TEM对Gd-DTPA-FA进行系统分析和评价其化学结构，并行毒性检测;MRI监测其对比性能。rn 结果:体外部分:'H NMR、质谱分析、红外干涉光谱仪、辐射仪(IRIS)和TEM等均证实Gd-DTPA-FA化学结构正确;体外MRI证实Gd-DTPA-FA能被脂肪酶激活且具有良好的MR I对比剂活性;且体内、外实验均证实Gd-DTPA-FA具有低的细胞毒性和良好的生物相容性;AP组，血清淀粉酶和脂肪酶水平从AP6小时至12小时显著升高，之后逐渐下降。rn 结论:1.合成的Gd-DTPA-FA纳米粒具有低的细胞毒性，良好的生物相容性和MRI对比剂活性等特点;2.AP胰腺组织释放的脂肪酶可特异性激活Gd-DTPA-FA纳米粒，在MRI T1WI上显影，实现对脂肪酶水平的活体动态监测;3.Gd-DTPA-FA作为MRI分子探针，在MRI分子影像上可反映胰腺细胞的功能状态和胰腺组织的损伤程度，在AP发病1小时便可特异性早期诊断急性胰腺炎。新型靶向含礼纳米粒子Gd-DTPA-FA具有低细胞毒性，且能早期特异性识别AP的特性，可为临床诊断AP提供新的思路和方法，有望提高AP的早期诊断率。

摘要： 本发明中涉及的方法浓缩脐带血中的间质干细胞，将浓缩的间质干细胞使用特定的因子不分化地增殖。

摘要： 本发明提供了人脐带间质干细胞外泌体的分离纯化方法和人脐带间质干细胞外泌体的应用，属于医药技术领域。本发明用无血清培养基培养人脐带间质干细胞，收集上清液，经过离心和超滤浓缩，得到浓缩液移至30％蔗糖重水密度垫上采用蔗糖密度离心进一步纯化，得到人脐带间质干细胞外泌体。本发明通过分离纯化得到人脐带间质干细胞外泌体有效降低免疫反应性，使用时保证剂量可控。所述人脐带间质干细胞外泌体通过提高二型糖尿病动物模型胰岛素信号通路的活化程度，抑制肝糖原合成分解，从而实现葡萄糖代谢稳态的调节，同时提高二型糖尿病动物模型对胰岛素的敏感性及胰岛β细胞的胰岛素分泌功能降低血糖浓度，实现制备治疗二型糖尿病的药物的应用。

摘要： 本发明关于一种人类间质干细胞体外快速增生佐剂，用以解决习知人类间质干细胞培养时细胞扩增效率不佳的问题。本发明的人类间质干细胞培养添加佐剂包括至少一种抗氧化剂、一第二型纤维母细胞生长因子（FGF‑2）。借此，将前述佐剂加入包含人类间质干细胞的培养基中，于常氧环境（约21%氧分压）培养后，出现细胞快速分裂、细胞周期合成期（S phase）比例提高、减少老化及提高分化潜能等现象，使本发明不仅可快速地扩增人类间质干细胞并获取生长因子，且仍可保有干细胞多功能性的特征，作为人类间质干细胞的培养及扩增的用途。

摘要： 本发明提供了人脐带间质干细胞外泌体的分离纯化方法和人脐带间质干细胞外泌体的应用，属于医药技术领域。本发明用无血清培养基培养人脐带间质干细胞，收集上清液，经过离心和超滤浓缩，得到浓缩液移至30％蔗糖重水密度垫上采用蔗糖密度离心进一步纯化，得到人脐带间质干细胞外泌体。本发明通过分离纯化得到人脐带间质干细胞外泌体有效降低免疫反应性，使用时保证剂量可控。所述人脐带间质干细胞外泌体通过提高二型糖尿病动物模型胰岛素信号通路的活化程度，抑制肝糖原合成分解，从而实现葡萄糖代谢稳态的调节，同时提高二型糖尿病动物模型对胰岛素的敏感性及胰岛β细胞的胰岛素分泌功能降低血糖浓度，实现制备治疗二型糖尿病的药物的应用。

摘要： 本发明中涉及的方法浓缩脐带血中的间质干细胞，将浓缩的间质干细胞使用特定的因子不分化地增殖。

摘要： 本发明关于一种人类间质干细胞体外快速增生佐剂，用以解决习知人类间质干细胞培养时细胞扩增效率不佳的问题。本发明的人类间质干细胞培养添加佐剂包括至少一种抗氧化剂、一第二型纤维母细胞生长因子（FGF-2）。借此，将前述佐剂加入包含人类间质干细胞的培养基中，于常氧环境（约21%氧分压）培养后，出现细胞快速分裂、细胞周期合成期（Sphase）比例提高、减少老化及提高分化潜能等现象，使本发明不仅可快速地扩增人类间质干细胞并获取生长因子，且仍可保有干细胞多功能性的特征，作为人类间质干细胞的培养及扩增的用途。

摘要： 本发明公开了一种用于骨髓间质干细胞治疗系统性硬化辅助设备，具体涉及干细胞治疗领域，包括颈部束缚固定机构，颈部束缚固定机构的一侧固定安装有肩部束缚限位机构，颈部束缚固定机构与肩部束缚限位机构之间均固定安装有大臂支撑调节机构；大臂支撑调节机构包括侧置支撑型底座，侧置支撑型底座焊接在颈部束缚固定机构的一侧，侧置支撑型底座的一侧焊接有外螺纹连接杆。本发明通过设置了大臂支撑调节机构，旋转旋转型握把使得第一弧形支撑管段与侧置支撑型底座之间的间距加大，导致患者的大臂与胸腔附近的间距同时加大，相对提升了颈部静脉采血时手臂支撑与调节控制的便捷性。

摘要： 本发明属于生物细胞技术领域，具体涉及一种把骨髓间质干细胞体外定向诱导分化为淋巴管内皮细胞的方法。我们在体外分离、培养、鉴定具有一定的纯度的骨髓间质干细胞，然后用50ng/ml浓度的VEGF－C156s进行定向诱导分化，得到了淋巴管内皮细胞，并进行了鉴定，确定证实得到的细胞为淋巴管内皮细胞。骨髓间质干细胞被诱导分化为淋巴管内皮细胞，为干细胞在淋巴水肿治疗以及淋巴系统相关疾病的治疗研究，提供了重要的实验依据资料。

摘要： 用携带人肝细胞生长因子基因的重组腺病毒转染骨髓间质干细胞，获得高表达肝细胞生长因子的干细胞，局部注射治疗心肌缺血，既可以改善局部缺血症状、降低胶原沉积，又可以修复部分坏死的心肌细胞，具有明显的治疗效果。

摘要： 本发明公开了一种用于骨髓间质干细胞治疗系统性硬化辅助设备，具体涉及干细胞治疗领域，包括颈部束缚固定机构，颈部束缚固定机构的一侧固定安装有肩部束缚限位机构，颈部束缚固定机构与肩部束缚限位机构之间均固定安装有大臂支撑调节机构；大臂支撑调节机构包括侧置支撑型底座，侧置支撑型底座焊接在颈部束缚固定机构的一侧，侧置支撑型底座的一侧焊接有外螺纹连接杆。本发明通过设置了大臂支撑调节机构，旋转旋转型握把使得第一弧形支撑管段与侧置支撑型底座之间的间距加大，导致患者的大臂与胸腔附近的间距同时加大，相对提升了颈部静脉采血时手臂支撑与调节控制的便捷性。