微RNA-21-5p靶向调控含硬化蛋白域蛋白1对甲状腺癌细胞生长的影响

摘要

目的:通过分析微RNA(microRNA,miR)-21-5p及其靶基因含硬化蛋白域蛋白1(recombinant sclerostin domain containing protein 1,SOSTDC1)在甲状腺癌中的作用,深入了解甲状腺癌转移的分子机制.方法:通过生物信息学分析和细胞验证筛选出miR-21-5p,通过miR-21-5p抑制剂转染甲状腺癌细胞系;采用MTT实验、流式细胞术和细胞划痕实验分别检测miR-21-5p抑制剂组和抑制剂对照组的甲状腺癌细胞增殖、凋亡和迁移的情况;采用荧光素酶报告实验验证miR-21-5p和SOSTDC1的靶向调控关系;采用蛋白质印迹法检测miR-21-5p抑制剂组和抑制剂对照组甲状腺癌细胞中SOSTDC1、下游磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)和丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPK)/细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)信号通路因子的表达水平及磷酸化水平.结果:MiR-21-5p在甲状腺癌细胞中显著上升,且与SOSTDC1呈负相关(r=?0.24,P<0.01);miR-21-5p抑制剂组甲状腺癌细胞增殖和迁移显著低于抑制剂对照组(均P<0.01),细胞凋亡率显著高于抑制剂对照组(P<0.01);荧光素酶报告实验表明miR-21-5p能够靶向调控SOSTDC1表达水平;甲状腺癌细胞中PI3K/Akt和MAPK/ERK信号通路检测显示miR-21-5p抑制剂组PI3K表达水平显著低于抑制剂对照组(P<0.01),Akt和ERK1/2水平无显著变化,但miR-21-5p抑制剂组Akt和ERK1/2磷酸化水平显著低于抑制剂对照组(均P<0.01).结论:甲状腺癌细胞中miR-21-5p能够靶向抑制SOSTDC1的表达,影响PI3K/Akt和MAPK/ERK活性,从而抑制甲状腺癌细胞凋亡,促进细胞的增殖和迁移能力.