PI3Kδ抑制剂idelalisib对人髓系白血病细胞增殖的抑制作用及对阿霉素耐药性的逆转作用

摘要

目的:观察阿霉素(adriamycin,ADM)单药、艾德拉尼(idelalisib)单药以及ADM联合idelalisib对人髓系白血病细胞株K562和K562/ADM的增殖以及细胞内ADM相对浓度的影响,探讨idelalisib对K562和K562/ADM两种细胞株ADM耐药的逆转作用及其机制.方法:以K562及K562/ADM细胞株为观察对象,分别以不同浓度ADM及idelalisib进行干预,计算ADM对两种细胞株的半抑制浓度(50％inhibitory concentration,IC50)及耐药指数(resistance index,RI);计算idelalisib对于两种细胞株的无细胞毒性作用浓度(细胞抑制率<5％).后续将K562和K562/ADM细胞株分别分为ADM组和ADM+idelalisib组.分别用MTT法、生物发光法和流式细胞术检测各组细胞存活率、细胞株内ATP和ADM水平的变化.结果:随着ADM浓度的增加,K562及K562/ADM细胞存活率相应降低,呈剂量依赖性;ADM在K562与K562/ADM细胞株中的IC50分别为0.2 mg/L和1.0 mg/L,RI为5.随着idelalisib浓度的增加,K562及K562/ADM细胞存活率也相应降低,呈剂量依赖性;idelalisib对K562和K562/ADM细胞株的无细胞毒性体积浓度(抑制率<5％)分别约为25μmol/L和15μmol/L.MTT法结果显示:在K562/ADM细胞株中,ADM+idelalisib组的细胞存活率低于ADM组,差异有统计学意义(P<0.05);在K562细胞株中,ADM+idelalisib组的细胞存活率与ADM组相比差异无统计学意义(P>0.05).生物发光法结果显示:K562细胞株内ATP水平为(91.502±0.479)mmol/L,K562/ADM细胞株内ATP水平为(24.311±0.349)mmol/L.在K562/ADM细胞株中,ADM+idelalisib组ATP水平低于ADM组,差异有统计学意义(P<0.05);在K562细胞株中,ADM+idelalisib组ATP水平与ADM组相比差异无统计学意义(P>0.05).流式细胞术检测结果显示:在K562/ADM细胞株中,ADM+idelalisib组ADM吸收率高于ADM组,差异有统计学意义(P<0.05);在K562细胞株中,ADM+idelalisib组ADM吸收率与ADM组相比差异无统计学意义(P>0.05).在K562/ADM细胞株中,ADM+idelalisib组ADM排除率低于ADM组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);在K562细胞株中,ADM+idelalisib组ADM排除率与ADM组相比差异无统计学意义(P>0.05).结论:Idelalisib对体外髓系白血病细胞株K562及K562/ADM均有细胞毒性作用,并能部分逆转K562/ADM细胞株对ADM的耐药.其逆转机制可能是通过增加细胞内ADM蓄积和诱导细胞凋亡而实现的.