注射用心肌肽对幼鼠离体心脏缺血再灌注能量代谢的影响

摘要

目的:探讨注射用心肌肽对幼鼠离体心脏缺血再灌注能量代谢的影响及机制.方法:50只SD幼鼠,随机分为5组(n=10),正常对照组:心脏灌流20 min稳定后,再持续灌注150 min;正常+注射用心肌肽组:同正常对照组,但在灌流液中加入注射用心肌肽50 mg/L;模型对照组:心脏灌流20 min稳定后,停搏液停搏(缺血)90 min,再恢复正常灌流(再灌注)60 min,建立心肌缺血再灌注损伤模型,灌流用K-H缓冲液,停搏用ST.Thomas'II停搏液;注射用心肌肽1组(CMP1组):停搏液加入注射用心肌肽100 mg/L;CMP2组:灌流液加入注射用心肌肽50 mg/L及停搏液加入注射用心肌肽100 mg/L).监测不同组离体灌流心脏心率(HR)、收缩力(△T)及最大收缩速度(+dT/dtmax)和最大舒张速度(-dT/dtmax)、冠状动脉流量(CF)、复搏时间,透射电镜观察缺血再灌注损伤模型组中幼鼠心肌组织超微结构改变.进一步检测3个缺血再灌注损伤组冠状动脉流出液中肌酸激酶同工酶(CK-MB)含量的变化,心肌组织能量及氧化抗氧化代谢指标、丙二醛、NO的含量,检测心肌组织NOS、醛糖还原酶的活性,实时荧光定量PCR相对定量检测心肌组织iNOS,eNOS和Akr1b4 mRNA表达.结果:正常对照组离体心脏长时间灌流后心功能无明显变化,注射用心肌肽对正常心脏心功能无明显影响.与模型对照组比较,两个用药组心搏功能下降轻微,冠状动脉流量较好.电镜观察可见模型对照组心肌肌原纤维断裂,线粒体肿胀,而用药组心肌组织结构较完整,线粒体未见明显肿胀变性.再灌注后,模型对照组CK-MB增加.与模型对照组比较, 两个用药组的CK-MB含量低,Na+-K+ ATP酶、Ca2+-Mg2+ ATP酶、心肌总ATP酶活性相对较高,超氧化物歧化酶活性也增高,丙二醛、NO含量低,心肌组织NOS、醛糖还原酶的活性下降,iNOS,Akr1b4 mRNA表达下调,其中CMP2组改变更为明显(P<0.01或P<0.05).此外eNOS mRNA表达在CMP2组升高(P<0.05),而在CMP1组中变化无统计学意义(P>0.05).结论: 注射用心肌肽可改善缺血心脏再灌注后的能量代谢,增加冠状动脉流量,提高心功能,对幼鼠未成熟心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,灌流液及停搏液均加入注射用心肌肽对未成熟心肌缺血再灌注损伤的保护作用效果更佳.其作用机制可能与抑制心肌细胞iNOS, Akr1b4 mRNA表达,减少NO生成,抑制醛糖还原酶的活性有关.