油菜线粒体DNA提取纯化方法研究

摘要

以油菜为实验材料,探讨了植物线粒体DNA提取纯化过程中的影响因素,构建了一套快捷、经济、高效的植物线粒体DNA提取纯化方法.该方法结合差速离心和密度梯度离心分离得到线粒体,酶消化处理去除其他基因组的污染,用SDS与蛋白酶裂解线粒体,通过高盐沉淀,有机溶剂抽提,最后再用CTAB纯化得到mtDNA.用该方法提取的油菜线粒体DNA,经紫外分光光度计测定其纯度、限制性内切酶进行酶切.结果表明,此提取方法得到的mtDNA,其纯度可以满足后续遗传学分析.该法适用于不同植物材料mtDNA的提取纯化.