G蛋白偶联受体MAS对肝脏糖脂代谢的影响

摘要

目的 探究G蛋白偶联受体MAS(MAS receptor,MASR)对肝脏糖脂代谢的影响.方法 采用MAS腺病毒感染人肝癌细胞株HepG2细胞,再加入毒胡萝卜素(thapsigargin,Tg)诱导内质网应激,检测HepG2细胞内三酰甘油(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)及糖原(glycogen)含量;Real-time PCR检测HepG2细胞内内质网应激、细胞凋亡以及糖脂代谢相关基因mRNA水平;Western blotting法检测、葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6-phosphatase,G6pase)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)、乙酰辅酶A羧化酶α(acetyl CoA carboxylase α,ACCα)、磷酸化乙酰辅酶A羧化酶α(phosphorylated-acetyl CoA carboxylaseα,p-ACCα)、蛋白水平.结果 内质网应激诱导MAS基因的表达;MAS过表达明显降低内质网应激相关基因C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)、葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)、活化转录因子6(activating transcription factor6,ATF6)、X盒结合蛋白1(Xbox-binding protein1,Xbp1)和肌醇需求酶1(inositol requiring protein-1,IRE1)的表达,同时,细胞凋亡相关基因Bax和Caspase-12表达明显降低.MAS过表达降低Tg诱导的HepG2细胞内三酰甘油,此外HepG2细胞内糖原浓度升高.同时,在分子水平,糖异生关键酶G6pase、PEPCK在mRNA及蛋白水平表达下调,脂质合成相关的FAS和ACCα表达也下调,差异均有统计学意义.结论 MAS改善HepG2细胞糖脂代谢,可能与MAS对肝脏内质网应激和凋亡的保护作用有关.