二维液相色谱法同时测定人血浆中伊马替尼及其代谢产物浓度的方法学研究

摘要

目的:建立一种同时、快速检测人血浆中甲磺酸伊马替尼(imatinib mesylate,IM)及其代谢产物浓度的二维液相色谱法,并应用于临床.方法:血浆样品经过蛋白沉淀、离心后直接进样,通过使用二维液相色谱仪进行检测.一维萃取柱:型号为Aston SX1(3.5 mm×25 mm,5μm),流动相为V(甲醇):V(乙腈):V(磷酸铵水溶液)=25:20:55,流速=0.8 mL/min;中间柱:型号为Aston SCB(4.6 mm×10 mm,3.5μm);二维分析柱:型号为Aston SCB(4.6 mm×125 mm,5μm),流动相为V(乙腈):V(磷酸铵盐溶液)=38:62,pH=6.9,流速=1.2 mL/min;柱温:40°C,检测波长:264 nm,进样量:500μL.结果:色谱图显示IM及其代谢产物与杂质分离良好;IM与N-去甲基伊马替尼(N-Desmeth-yl imatinib,NDI)血药浓度线性范围分别是13.44～1400.00 ng/mL(R2=0.9999)与13.17～1372.00 ng/mL(R2=0.9999),线性关系均良好,定量下限变异系数分别为5.79％和2.77％,灵敏度良好;二者均可在12.80 min内完全出峰,方法回收率均高于90％,日内、日间精密度均小于6％,稳定性试验相对标准偏差均小于5％.所建立方法对10位口服IM的胃肠间质瘤患者进行了IM及NDI血药浓度检测,结果IM血药浓度结果为300.34～1392.07 ng/mL不等;NDI血药浓度在122.44～446.34 ng/mL之间.结论:该方法简便、快捷、灵敏度高、重现性好,结果准确且成本低廉,且适用于临床IM血药浓度检测.