miR-143-3p对脑梗死大鼠神经细胞凋亡及Nrg-1/ErbB4信号通路的影响

摘要

目的探讨微小核糖核酸(miR)-143-3p对神经调节蛋白(Nrg)-1/erb-b2受体酪氨酸激酶(ErbB)4信号通路的调节作用,及对脑梗死大鼠神经细胞凋亡的影响.方法将2018年3月-2019年3月在南充精神卫生中心医院神经内科就诊的30例脑梗死患者,分为脑梗死轻度组(脑梗死体积15cm^(3)),每组10例,另取同期在本院接受体检的健康志愿者10例,作为正常组,用RT-qPCR法测血清中miR-143-3p表达水平.取SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、miR-143-3p沉默(si-miR-143-3p)组(尾静脉注射含miR-143-3p低表达序列的腺病毒载体溶液)、空载体质粒(si-eGFP)组(尾静脉注射腺病毒空载体溶液)、Nrg-1基因沉默(Si-Nrg-1)组(尾静脉注射含Nrg-1低表达序列的腺病毒载体溶液)、si-miR-143-3p+Si-Nrg-1组(同时注射si-miR-143-3p及Si-Nrg-1载体溶液),每组15只;中动脉闭塞栓塞术制备脑梗死模型,Longa法对神经功能缺损进行评分;TTC法测脑梗死面积;尼氏及TUNEL法测海马神经元损伤及凋亡;RT-qPCR法测脑海马组织miR-143-3p表达;免疫组化法测Nrg-1阳性表达;Western blot法测Nrg-1、ErbB4、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)-3、caspase-9蛋白表达.结果与正常组相比,脑梗死患者血清中miR-143-3p表达升高(P<0.05),且脑梗死越严重miR-143-3p表达越高(P<0.05).与假手术组相比,模型组大鼠死亡、脑梗死面积、神经功能缺损评分升高,海马神经元损伤及凋亡加重,miR-143-3p及Nrg-1/ErbB4通路蛋白表达均升高(P<0.05).沉默miR-143-3p后,大鼠Nrg-1/ErbB4通路蛋白表达升高,海马神经元损伤及凋亡缓解,脑梗死面积及神经功能缺损症评分降低(P<0.05).Si-Nrg-1可逆转沉默miR-143-3p介导的Nrg-1/ErbB4神经保护途径激活,进而加重脑梗死大鼠神经元损伤及凋亡进程(P<0.05).结论miR-143-3p在脑梗死患者血清中表达上调,沉默miR-143-3p可通过上调Nrg-1表达,促进Nrg-1/ErbB4介导的神经元保护途径激活,缓解脑梗死大鼠海马神经元损伤及凋亡.