活细胞钙离子浓度荧光显微检测系统的研制和应用

摘要

研制了活细胞钙离子浓度荧光显微检测系统.该系统的工作原理是:氙灯发射的光线被椭球面镜聚焦后以衍射光栅分光,通过光纤、双路耦合聚光镜和物镜将单色光纤入样本平面以激发细胞中的钙离子荧光探针发出荧光,最后用光电倍增管检测荧光信号.使用该系统,测定了高K+去极化刺激下PC12细胞(大鼠嗜铬细胞瘤细胞)内[Ca2+]i变化的动态特性曲线.结果表明:静息状态下PC12细胞内[Ca2+]i为80.0±15.0nmol/L,高K+去极化刺激可使PCI2细胞内[Ca2+];增加到1.9±0.2μmol/L,上升至峰值时间约为20.1s.表明此系统可以满足检测活体细胞[Ca2+]i的需要.