SLC2 A6基因敲减诱导A549肺癌细胞G2/M期阻滞研究

摘要

SLC2A6是促进性糖转运蛋白家族中的一员,它编码GLUT6蛋白.SLC2A6基因的表达在许多癌症中都有上调,但在正常组织中没有得到广泛表达.为了阐明SLC2A6控制癌细胞增殖和凋亡的作用及其相关机制,利用CRISPR/Cas9技术筛选了两株敲减SLC2A6基因的肺腺癌A549细胞系,以阐明SLC2A6在生物学过程中的影响.与野生型A549细胞相比,KD1和KD2细胞中SLC2A6的蛋白水平的表达分别下降74％和83％,RNA水平的表达分别下降70.6％ ±2.0％ 和76.9％ ±4.1％.MTT实验的结果表明KD细胞增殖速度较慢,第5天的细胞数目的 改变倍数由WT细胞的22.1±1.0下降到KD1细胞的13.5±0.9和KD2细胞的12.2±1.0(P<0.001).流式细胞术细胞周期分析表明,SLC2A6基因敲减(KD)细胞发生了G2/M期阻滞.G2期细胞占比由A549野生型(WT)细胞的16.0％ ±1.0％升高到KD1细胞的23.0％ ±1.1％或KD2细胞的27.4％ ±0.4％(P<0.05).细胞周期调节因子的mRNA表达的结果表明,G2/M阻滞与APC、Rad9a、CDK1、cdc25和p21Waf1/Cip1的表达调控有关,揭示了SLC2A6在调控癌细胞生长方面的新作用,这表明SLC2A6可能是一个可行的抗癌药物靶点.