三疣梭子蟹fps克隆及其在卵巢发育中的表达分析

摘要

法尼基焦磷酸合成酶(FPS)是类异戊二烯生物合成途径中的关键酶,参与甲壳动物甲基法尼酯(MF)等萜类激素的合成.为研究FPS在甲壳动物卵巢发育中的调控作用,采用RT-PCR和cDNA末端快速扩增技术(RACE技术)克隆得到了三疣梭子蟹fps(Ptfps)的序列全长(GenBank登录号:KM013803).结果显示:Ptfps cDNA全长为2360 bp,开放阅读框长1290 bp,编码429个氨基酸.生物信息学分析发现PtFPS具有7个异戊烯基转移酶的保守结构域,与已公布的内华达古白蚁FPS同源性最高(达到58％).实时荧光定量PCR分析结果显示:fps主要在大颚器(MO)中表达,远高于其它组织的表达水平(P＜0.01);在第1次卵巢发育过程中,fps的表达水平在Ⅳ期显著升高(P＜0.05),之后略有下降;在第2次卵巢发育过程中,fps的表达水平在Ⅲ期显著升高(P＜0.05),并在Ⅳ期达到最大.以上结果表明fps可能参与三疣梭子蟹卵巢发育的调控.