兔肝金属硫蛋白β结构域的制备和鉴定

摘要

制备一定量的Ｃｄ、Ｚｎ兔肝金属硫蛋白，然后脱掉其中的金属，获得不含金属的硫蛋白，用一价金属ＣｕＣｌ或ＡｇＮＯ３以５．８：１的金属：蛋白摩尔比与ａｐｏＭＴ结合，将其β结构域用金属饱和，在３７℃，ＰＨ７．０下用枯草杆菌蛋白酶水解掉未结合金属的α结构域，获得Ｃｕ（Ⅰ）、Ａｇ（Ⅰ）结合的兔肝ＭＴ－Ⅰ、ＭＴ－Ⅱ的β结构域，通过ＨＰＬＣ、羧甲基化后的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、氨基酸组成分析、金属定量、Ｎ末端分析和紫外