重组人干扰素α_(2a)和胸腺肽α_1融合蛋白的分子设计及其基因表达产物的鉴定

摘要

人干扰素α2a(IFNα2a)和胸腺肽α1(THYα1)联合使用效果远大于各自单独使用的效果,本文通过DNA重组技术将两者构建成一个融合蛋白药物。首先,依据IFNα2a和THYα1的分子结构,设计了一个连接肽,将IFNα2a和THYα1相连,并分别位于该融合蛋白的N端和C端。在此基础上,构建出表达载体pCJ101质粒,获得的阳性克隆307在2×YT培养基小试中,产物变性复性后经DEAE-Sepharose柱层析纯化后,在SDS-PAGE上得到相对分子质量为23 000的谱带。经鉴定,融合蛋白中干扰素α2a的比酶活性为18.34 mol/s.g;检测胸腺肽α1的活性,显示活性E玫瑰花结形成率达到20%。结果表明,融合蛋白中两种药物蛋白均较好地保持各自的生物功能,为继续研究奠定了良好基础。