混合拥挤试剂对人肌肌酸激酶稳定性的影响作用研究

摘要

为了更加真实地模拟细胞内环境,在人肌肌酸激酶(HCK)的去折叠环境中同时加入了大分子拥挤试剂(葡聚糖)和小分子渗透剂(蔗糖),采用酶活性、荧光发射谱和溶液浊度检测等方法研究肌酸激酶在含有蔗糖和葡聚糖的混合拥挤环境中的稳定性,结果表明在肌酸激酶盐酸胍变性过程中,蔗糖不仅抑制肌酸激酶酶活性的丧失,还稳定肌酸激酶的构象,而葡聚糖对肌酸激酶保护能力相对较弱.对于热变性过程,相同质量浓度的蔗糖和葡聚糖能同等程度地减缓肌酸激酶活性的丧失,并抑制聚沉的产生.在葡聚糖和蔗糖同时存在的情况下,两者的保护作用可以累加,并共同维持肌酸激酶的稳定性.