顺铂对离体C57小鼠耳蜗毛细胞的损害作用

摘要

目的 探讨离体培养条件下顺铂致C57小鼠耳蜗毛细胞损伤的特点.方法 出生后3～4天的C57小鼠耳蜗基底膜离体培养6～8小时后,加入不同浓度的顺铂(0、10、50、100、400、1 000 μmol/L)无血清培养液继续培养48小时,其中0μmol/L为正常对照组,10～1 000μmol/L组为实验组,0～100μmol/L4组,每组各7只耳蜗,400和1 000 μmol/L两组各6只耳蜗.采用TRITC-Phalloidin和DAPI染色,荧光显微镜下观察耳蜗毛细胞生长情况并拍照计数、绘制毛细胞缺失图,运用SARS 8.0软件进行直线回归分析比较各组的毛细胞缺失率.结果 对照组耳蜗基底膜毛细胞在离体培养条件下生长良好,偶见缺失.实验组中顺铂引起毛细胞的缺失程度从底回至顶回大致均匀.随着顺铂浓度从10 μmol/L增加到100 μmol/L,毛细胞的缺失率从14.5%上升到78.4%;顺铂浓度升高至400 μmol/L及1 000μmol/L时,毛细胞缺失率下降至48.8%和8.77%.细胞缺失区域可见DAPI着色的浓缩核.结论 离体培养条件下,顺铂对耳蜗毛细胞的损伤在一定浓度范围内呈剂量依赖性,超过一定剂量后顺铂所致毛细胞损伤又逐渐减少;内外毛细胞的损伤从底回至顶回呈现均一性.