胚胎大鼠脑纹状体和中脑神经干细胞的培养

摘要

目的研究大鼠脑不同部位胚胎神经干细胞的增殖分化特性.方法采用无血清培养基分离和培养大鼠脑的纹状体和中脑的神经干细胞,通过巢蛋白(nestin)表达和5-溴脱氧尿嘧啶(5-bromo-2'-deoxyuridine BrdU)染色,鉴定细胞的增殖能力;通过新生神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的特异性免疫细胞化学染色,鉴定培养细胞的多潜能性.通过酪氨酸羟化酶的染色(tyrosine hydroxylase,TH)鉴定多巴胺神经元.结果二者在体外培养都可增殖成球,并能分化成神经系统3个谱系的细胞.纹状体增殖传代3个月,中脑培养细胞增殖维持3周.中脑干细胞分化TH阳性细胞比例高于纹状体.结论培养的胎鼠脑细胞是神经干细胞.纹状体干细胞增殖能力高于中脑干细胞,中脑干细胞更倾向于分化成TH阳性细胞.