高尔基体驻膜糖蛋白GP73启动子克隆

摘要

[目的]寻找并克隆有活性的高尔基体膜蛋白GP73的启动子.[方法]对CP73基因转录起始住点上游1000 bp至下游400 bp序列进行软件分析预测,以肝癌细胞系Huh7基因组DNA为模板,扩增目标片段,构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因的重组质粒.转染细胞后在荧光显微镜下观察EGFP的表达,并采用流式细胞仪定量检测转染细胞的荧光强度.[结果]发现GP73转录起始位点上游980到下游330 bp长1 310 bp的序列具有启动子功能.该区域可能具有两个核心启动子序列和多个保守序列,包括TATA box和NF-kβ、AP1、GG-SP1等DNA结合序列.[结论]该研究为探讨GF·3的转录机制提供了参考.