Bt基因介导的大豆抗蚜虫表达载体的构建

摘要

[目的] 构建用于大豆抗蚜虫研究的Bt基因介导的Cry1Ac植物表达载体.[方法] 以含有Cry1Ac的质粒pRH201为模板进行PCR扩增,将PCR产物克隆至载体质粒pBS中,将重组质粒转化至大肠杆菌DH5α,并对重组质粒进行酶切和测序鉴定.经验证的Cry1A基因扩增产物双酶切后与pBI121载体连接转化,挑取重组子pBIC121进行BamH Ⅰ/SnaB Ⅰ双酶切鉴定. [结果] 从pRH201质粒中扩增获得长约3.5 kb的Cry1Ac基因序列,对重组质粒pBSCRY的插入片段进行测定,确定了Cry1Ac片段的全长为3 534 bp,共编码1 176个氨基酸.[结论] 构建了Cry1A基因的植物表达载体,为大豆抗蚜虫转基因研究奠定了基础.