表达禽流感病毒核蛋白重组噬菌体的构建

摘要

利用PCR技术,扩增去除部分序列,长度为1 320 bp,编码440个氨基酸的禽流感病毒(AIV)核蛋白基因片段,将其克隆至pR质粒的T4噬菌体SOC基因C末端获得重组质粒pR-np,以此重组载体转化大肠杆菌(Escherichia coli)2(E2),用溶菌酶缺陷噬菌体T4-z1感染重组E2菌,重组载体与缺陷噬菌体T4-z1基因发生同源重组,将np基因整合到噬菌体基因组中,用PCR方法筛选重组噬菌体并命名为T4-z1-np.经Western blot检测证实,T4-z1-np表达的NP融合蛋白具有免疫学活性.成功地构建了表达禽流感病毒核蛋白的重组噬菌体.