阿蒂擎天乙烯利催花条件下抑制差减文库构建与分析

摘要

本研究以阿蒂擎天(Cuzmania Attila)植株为材料,利用400μL/L 乙烯利灌心,处理0、1 h、6 h和24 h,分别提取总RNA,纯化获得mRNA,以处理0 h的材料为驱动,运用抑制差减杂交技术进行正向差减杂交,获得3个差异表达基因文库.随机挑取3个文库中的1063个白斑,利用菌落PCR方法,筛选到990个阳性克隆,全部进行了序列测定与分析,结果表明,其中有518个基因序列,205个片段与GenBank中已知基因高度同源,313个片段未发现同源基因.利用地高辛标记对部分序列进行反向Northern斑点杂交分析,发现乙烯处理1~6h,诱导表达的基因数量最多