猪MiR-148a对肝脏发育调控的初步研究

摘要

miR-148a是miR-148/152家族中的一员,对细胞增殖、细胞分化、癌症发生等生物过程有重要的调控作用.本研究采用Real-time quantitative PCR(qRT-PCR)方法,定量检测miR-148a在金华猪(Sus scrofa)不同发育时期肝脏中的表达变化,结果显示,miR-148a在胚胎期的肝脏中表达量最高;出生后,随着日龄的增加表达量逐渐降低;为了了解miR-148a的生物学功能和过程,对其进行GO (gene ontology)功能注释和KEGG (kyoto encyclopedia of genes and genomes)通路分析.结果显示,miR-148a参与肝脏的生长发育调控过程.为了验证miR-148a的靶基因,利用胎鼠(Mus musculus)肝细胞构建miR-148a过表达和抑制表达的细胞模型,以此来探究miR-148a的表达变化对靶基因在mRNA水平的影响.结果发现,在小鼠胎肝细胞中过表达miR-148a可以显著降低CCAAT增强子结合蛋白α基因(CCAAT-enhancer binding protein-alpha,Cebpa)的表达量(P＜0.05).进一步检测发现,在金华猪肝脏生长过程中Cebpa与miR-148a的表达呈负相关.根据这些结果推测,miR-148a可能在肝脏发育过程中通过降低Cebpa的表达来调控细胞增殖和分化效应之间的平衡.