游离与复合形式的心肌肌钙蛋白I快速免疫测定法的建立

摘要

目的 制备结合游离与复合形式的心肌肌钙蛋白I(cTn I)单克隆抗体(mAb),建立快速免疫测定法用于急性心肌梗死(AMI)的诊断.方法 mAb 通过提纯的人cTn I免疫小鼠和杂交瘤细胞融合技术制备, Western blotting 和间接酶联免疫吸附技术(ELISA)鉴定cTn I mAb的特异性.利用筛选的mAb 建立双抗夹心模式的ELISA 快速免疫测定法.结果 制备的mAb仅和游离或复合形式的cTn I结合,与cTn C、cTn T无交叉反应.快速免疫测定法最低检测限1.2 μg/L;阳性、阴性质控平均批内CV分别是11.3%和9.3%,批间CV分别是16.4%和12.2%.快速免疫测定法与定量ELISA法同步检测415例样本,符合率92.77%.检测43例AMI病人和42例正常人样本,其诊断敏感性和特异性分别是91.48%和95.45%.结论 制备的抗cTn I mAb可以和游离或复合形式的cTn I结合,据此建立的cTn I快速免疫法可方便地应用于AMI实验室诊断.