vp2基因特异miRNA对鸡传染性法氏囊病毒复制的抑制

摘要

为探索vp2基因特异miRNA对鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)复制的抑制作用,在前期研究基础上,将2个有效的vp2基因特异miRNA表达框分别克隆入含neo基因的pTarget载体中,获得miRNA单表达或双表达载体,重组载体转染DF-1细胞后经G418筛选、鸡传染性法氏囊病毒Lurket株感染,通过半定量RT-PCR法、病毒滴定法分别检测vp2基因转录子的表达情况与细胞上清中的病毒TCID50.结果表明,vp2基因转录子水平明显降低,最高降低达80.7％,病毒TCID50可下降5lg2～6lg2.前期筛选到的2个vp2基因特异的miRNA在筛选过的细胞系中均能有效抑制病毒复制,为RNA干扰技术在鸡传染性法氏囊病的防治应用中奠定了基础.