高致病性血清4型禽腺病毒hexon基因在昆虫细胞中的表达及鉴定

摘要

为获得杆状病毒表达的重组高致病性血清4型禽腺病毒(Fowl adenovirus serotype 4,FAdV-4)六邻体蛋白(Hexon),本研究通过PCR从高致病性血清4型禽腺病毒基因组中扩增到hexon基因,克隆到杆状病毒转移载体pFastBac-1,获得重组转移质粒pFastBac-hexon,将其转化DH10Bac大肠杆菌并筛选,获得重组杆状病毒穿梭质粒rBacmid-hexon,将重组杆状病毒穿梭质粒转染Sf9细胞,获得重组杆状病毒rBV-hexon.间接免疫荧光试验和免疫印迹试验结果显示,Sf9细胞中的Hexon蛋白能够与血清4型禽腺病毒阳性血清发生特异性反应,蛋白质分子量约110000,表明Hexon蛋白在Sf9细胞中获得良好的表达.