禽腺病毒血清4型Fiber-2蛋白在大肠杆菌中可溶性表达及其免疫原性分析

摘要

旨在解决大肠杆菌表达系统对禽腺病毒血清4型(FAdV-4) Fiber-2蛋白进行表达时存在的多包涵体问题。通过添加不同的化学伴侣分子来提升Fiber-2的可溶性表达量,并进一步通过动物试验评价蛋白的免疫原性。结果显示,添加化学伴侣分子β-环糊精显著提高了Fiber-2的可溶性表达量,且重组蛋白与FAdV-4阳性血清具有良好的反应性,琼脂扩散(AGP)效价达1∶128;以表达的可溶性Fiber-2蛋白作为抗原,制备油乳剂疫苗并免疫SPF鸡,通过AGP检测免疫后血清中针对FAdV的特异性抗体水平,结果Fiber-2蛋白疫苗及FAdV-4全病毒灭活疫苗于免疫后14 d,均可诱生特异性的AGP抗体。以上结果表明β-环糊精显著提高了Fiber-2的可溶性表达量,且免疫原性良好。本研究为FAdV-4亚单位疫苗的研制及产业化奠定了基础。