唐山市甲型H1N1和H3N2亚型流感病毒神经氨酸酶基因特征分析

摘要

目的 分析甲型H1N1和H3N2亚型流感病毒神经氨酸酶(neuraminidase,NA)基因特征及耐药相关位点突变.方法 随机选取2013-2016年唐山市分离的12株甲型H1N1和13株H3N2亚型流感病毒提取RNA,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增目的片段并测序,采用MEGA 6.0软件构建NA基因核苷酸系统进化树,BioEdit v7.2.5软件比较核苷酸序列和氨基酸变异情况.结果 2013-2016年12株甲型H1N1和13株H3N2流感病毒NA基因核苷酸同源性分别为98.5％～100.0％和98.1％～100.0％.NA核苷酸进化分析表明,甲型H1N1和H3N2流感病毒分别属于6B和3C分支,其中2013-2014年6株甲型H1N1毒株位于6B分支,与疫苗株相比有9个氨基酸突变位点,2015-2016年6株H1N1毒株进化为不同亚支:2株6B.1亚支新增V13I、P93S和I314M位点突变,3株6B.2亚支新增L67I和T381I突变,1株6B分支新增I117M、I288V和S450G突变;2013-2014年、2014-2015年、2015-2016年H3N2毒株分别位于3C、3C.3a和3C.2a1亚支,与疫苗株A/Texas/50/2012 (3C.1)比较,3C.3a亚支病毒拥有V143M、E221D、P386S和I392T位点突变,与A/Switzerland/9715293/2013(3C.3a)比较,3C.2a1亚支病毒拥有S245N(增加一个糖基化NAT245-247)、S247T、T267K、P339N、I380V和P468H位点突变.奥司他韦和扎那米韦主要耐药基因位点未发现突变.结论 唐山市甲型H1N1和H3N2亚型流感病毒NA基因出现了新的基因进化分支.