耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的整合子分布及MLST分析

摘要

目的 收集该院临床分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP),通过研究CRKPⅠ、Ⅱ、Ⅲ类整合子分布情况,碳青霉烯类耐药基因携带情况,以及多位点序列分型(MLST),了解CRKP的耐药情况与流行病学特征。方法 收集、保存临床送检标本中分离的CRKP 45株,采用BD phoenix M50全自动细菌鉴定仪进行药敏试验,并用质谱仪再次进行细菌鉴定。整合子及可变区测定采用PCR扩增,并对阳性菌株可变区进行测序分析及比对;采用改良碳青霉烯灭活试验(mCIM试验)进行表型确认,采用PCR扩增碳青霉烯类耐药基因,以及MLST方法分析其同源性。结果 45株CRKP中检测出Ⅰ类整合子阳性菌株共44株,未检出Ⅱ类及Ⅲ类整合子。有36株菌株成功扩增出可变区。检出3种耐药基因盒,分别为aadA2(34/36)、dfrA1(1/36)、aac(6′)-Ib-cr(1/36)。45株CRKP扩增耐药基因测序结果显示,44株检测到bla基因,未检出bla、bla、bla、bla、bla基因。45株CRKP的优势序列分型(ST)主要为ST11型(43株),其余为ST15型(2株)。结论 该院CRKP以Ⅰ类整合子为主,尚未发现Ⅱ类及Ⅲ类整合子,CRKP对碳青霉烯类药物耐药的主要机制是携带bla基因,应及时采取防控措施,防止CRKP在院内的克隆传播。