高尿酸通过下调UCP2表达水平引起线粒体损伤的研究

摘要

目的在细胞水平探究高尿酸对线粒体解偶联蛋白2(UCP2)表达水平的影响,以探索高尿酸对HL7702细胞线粒体损伤作用的可能机制。方法通过实时荧光定量聚合酶链式反应(Q-PCR)和Western blot法分析3个不同浓度尿酸(400、800、1200μmol/L)对线粒体UCP2表达的影响,免疫荧光、荧光探针法等技术分析UCP2相关的线粒体损伤指标活性氧(ROS)、线粒体膜电位、三磷酸腺苷(ATP)合成的变化情况。结果与对照组相比,随着尿酸浓度的升高,3个浓度组(400、800、1200μmol/L)的线粒体UCP2 mRNA转录水平分别为对照组的46.30%、16.40%和5.00%(P<0.01),随着尿酸浓度的升高,线粒体UCP2蛋白表达也逐渐减少。ROS生成量随着尿酸浓度的升高呈现明显增加的趋势,3个浓度组(400、800、1200μmol/L)的ROS荧光强度分别为对照组的133、184和253倍(P<0.01),线粒体膜电位和ATP合成率与对照组比较则呈现明显降低趋势,3个浓度组(400、800、1200μmol/L)线粒体膜电位分别为对照组的14.53%、8.30%和4.70%(P<0.01),ATP合成率为对照组的83.45%、69.92%和55.64%(P<0.01)。结论随着尿酸浓度的增加,高尿酸对线粒体UCP2的mRNA和蛋白表达存在着抑制作用,并造成线粒体损伤。