UCP2过表达对心肌细胞线粒体炫的调控及内毒素心肌损伤的保护研究

摘要

目的：本实验拟通过脂多糖诱导乳鼠心肌细胞的脓毒症心肌损伤模型，探究 UCP2过表达能否调控脓毒症心肌线粒体炫的频率，以及是否有心肌保护作用。 方法：分离培养原代大鼠乳鼠心肌细胞，用LPS诱导建立脓毒症心肌损伤模型。分别用UCP2过表达腺病毒与对照空病毒转染心肌细胞。随机分为6组：正常组、UCP2过表达组、空病毒组、LPS组、LPS+UCP2过表达组、LPS+空病毒组。用cp-YFP腺病毒转染心肌细胞，使心肌细胞线粒体中表达cp-YFP，激光共聚焦显微镜采集图像， FlashSniper软件分析图像，观察各组线粒体炫的频率。分别检测各组CK、LDH水平， TNF-α、IL-6释放，TMRM染色法检测线粒体膜电位，WB检测各组UCP2蛋白表达水平。 结果：①与正常组相比，LPS组心肌细胞线粒体炫频率显著增高，CK、LDH、TNF-α、IL-6水平显著升高(P<0.05)；②LPS+UCP2过表达组与LPS组相比，线粒体炫频率明显下降，CK、LDH、TNF-α、IL-6 水平显著降低，但高于正常组(P<0.05)；线粒体膜电位显著上升，但低于正常组(P<0.05)；③LPS组UCP2蛋白表达显著高于正常组，但低于UCP2过表达组与LPS+UCP2过表达组(P<0.05)；④UCP2过表达组与LPS+UCP2过表达组UCP2蛋白表达显著高于正常组和 LPS组(P<0.05)；⑤空病毒的转染对心肌细胞无显著影响(P>0.05)。 结论：UCP2过表达能够减少脓毒症心肌细胞过量ROS的产生，部分逆转LPS诱导导致的心肌损伤，起到心肌保护作用。

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